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8 .( 2010· 山东理综, 34 )生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度 上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现,在微生物 M 产生的脂肪酶作用下, 植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)。 ( 1 )筛选产脂肪酶的微生物 M 时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提 供 ,培养基灭菌采用的最适方法是 法。 ( 2 )测定培养液中微生物数量,可选用 法直接计数;从微生物 M 分离提取的脂肪酶通常需要检测 ,以确定其应用价值;为降低生物柴油 生产成本,可利用 技术使脂肪酶能够重复使用。 ( 3 )若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热 DNA 聚合酶催化的 技术。 碳源 高压蒸汽灭菌 显微镜直接计数 酶活性(或:酶活力) 固定化酶(或:固定化细胞) PCR 9 .从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是:采集菌样 → 富集培养 → 纯种 分离 → 性能测定。 ( 1 )不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集 菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从 环境采集。 ( 2 )富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其在群落 中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生 物的富集培养应选择 的培养基,并在 条件下培养。 ( 3 )下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解,请 分析接种的具体方法。 获 得 图 A 效 果 的 接 种 方 法 是 , 获 得 图 B 效 果 的 接 种 方 法 是 。 ( 4 )配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行 ,接种前要进 行 ,在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在 条 件下进行。 海滩等高盐 以淀粉为唯一碳源 高温 稀释涂布平板法 平板划线法 pH 调整 高压蒸汽灭菌 无菌 10 .( 2011· 广东汕头一模, 26 )有机磷农药杀虫能力强,在粮食增产、传染病防治 等方面作用显著,但污染环境并危害人体健康。在众多的有机磷农药残留物降解技 术中,生物降解有高效、彻底、无二次污染的优势,其中,微生物由于具有较复杂 多样的代谢途径,是有机磷农药降解的主力军。 ( 1 )在富含有机磷农药残留成分的土壤中,更容易分离到能降解农药的微生物。根 据达尔文的理论,这是因为有机磷农药对于此类微生物具有 作用。 ( 2 )微生物具有复杂多样的代谢途径,从根本上说,是由微生物的 所决定的。 ( 3 )微生物主要通过酶促反应,将有机磷农药分解为无毒或者低毒的化合物。研究 发现,利用有机磷农药降解酶净化农药比利用微生物菌体更有效。 ①微生物群体中,最初的降解酶基因是由于 而产生的。从微生物 中提取到一种降解酶后,需要确定在何种环境中该酶的活性高,检测酶活性高低的 指标可以是 。 ②从天然菌株中提取降解酶的含量低,成本高,难以大量应用,科学家通过基因工 程解决了这一难题。他们在获得降解酶基因后,通过 技术对该基因进行 大量扩增,再利用 酶、 酶和运载体等作为基本工具,通过 一定的手段构建 ,并将其导入大肠杆菌体内,从而实现了高 效表达。 ③天然的降解酶对有机磷农药的降解率比较低,不能达到预期效果,科学家对降解 酶特定部位的氨基酸序列进行重新设计、改造,显著提高了其降解能力,这项技术 称为 。 选择(或者保留) 基因多样性(或者遗传多样性) 基因突变 单位时间中反应物减少量(或者单位时间中产物的增加量、有机磷农药降解的速率) PCR 限制酶) DNA 连接酶 目的基因表达载体 蛋白质工程 1. 从几千年前到现在,酶制剂就安全地在被使用在工业、美容和口腔护理产品、 纺织品、食品(如酸奶酪)以及芝士、啤酒和白酒等的发酵生产过程中。下 列各项中,不属于酶制剂的是( ) A .蛋白酶 B .脂肪酶 C
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