4.3红外光谱病理生理学.pdf

三、红外光谱鉴别法 （一）原理 物质分子吸收波数位于 4000~400cm-1 范围的红外光而产生的吸收光谱称为红外吸收光 谱。利用红外吸收光谱对物质进行分析的方法称为红外分光光度法（Infrared Spectrometry， 缩写为 IR ）。红外光谱法专属性强、应用较广（固体、液体、气体样品），是药物鉴别的重 要方法。IR 主要用于组分单一、结构明确的原料药，特别适合于用其他方法不易区分的同 类药物，如磺胺类、甾体激素类和半合成抗生素类药品。红外吸收光谱的纵坐标一般为透光 率（T％），横坐标为波数（cm-1 ）或波长（m ），一般用波数表示。与紫外吸收光谱不同， 红外吸收光谱中吸收峰的位置是透光率峰谷对应的红外光波数。 盐酸普鲁卡因的红外吸收光谱 一张红外光谱图按其特征可分为特征区（4000~1300cm- 1 ）和指纹区（1300～400cm-1 ）。 特征区的吸收峰由一些常见基团或化学键的振动产生，具有峰位恒定、峰相对稀疏、易于辨 认和归属的特点。指纹区内的峰，来源多，既有化学键的伸缩振动吸收、弯曲振动吸收，又 有泛频峰等弱吸收，这些峰峰位集中、强度变化大，不易于归属，但对特定化合物，该区域 具有人指纹一样的特征性。 ChP2010 收载的光谱图，系用分辨率为2 cm-1 条件绘制，基线一般控制在90%透光率以 上，供试品取样量一般控制在使其最强吸收峰在 10%透光率以下。ChP2010 收载的药品红 外光谱图的波数范围为 4000～400cm-1，而 BP 收载的光谱图绝大部分标准图谱为 2000～ 400cm-1 波数范围。 （二）方法 红外光谱的特征性强，除光学异构体及长链烷烃同系物外，几乎没有两种化合物具有完 全相同的红外吸收光谱，因此各国药典采用红外光谱法对药物进行鉴别。国家药典委员会编 订有《药品红外光谱集》第一～四卷。鉴别时，按《药品红外光谱集》中收载的制备方法制 备，再与该品种的标准图谱比较，应一致。 ChP 采用与标准图谱对照法，而USP 则采用与对照品同法测定后，比较IR 图谱的一致 性。例如，USP32 中阿莫西林的IR 鉴别方法：取本品，经干燥后用溴化钾压片法测定，所 得图谱与USP 阿莫西林对照品的图谱一致。 JP 将红外光谱鉴别法分为三种：与对照品比较法，标准图谱对照法，用吸收波数的鉴 别法。例如，JP15 中劳拉西泮的IR 鉴别：取本品，经干燥后用溴化钾压片法测定，其红外 光吸收图谱与标准谱图比较在相同波数处应有相似吸收度。 BP 红外光谱鉴别法：与对照品比较法，EP 标准图谱对照法和BP 标准图谱对照法。 （三）应用 1、原料药鉴别 除另有规定外，应按照中国药典委员会编订的《药品红外光谱集》各卷收载的各光谱图 所规定的方法制备样品。采用固体制样时，最常碰到的问题是多晶现象，固体样品的晶型不 同，其红外光谱往往呈现差异。当供试品的实测光谱与《药品红外光谱集》所收载的标准光 谱不一致时，在排除各种可能影响光谱的外在或人为因素后，应按该药品光谱图中备注的方 法或各品种正文中规定的方法进行预处理，再绘制光谱，进行比对。如未规定该品供药用的 晶型或预处理方法，则可使用对照品，并采用适当的溶剂对供试品与对照品在相同的条件下 同时进行重结晶，然后依法绘制光谱，比对。如已规定特定的药用晶型，则应采用相应晶型 的对照品依法比对。当采用固体制样技术不能满足鉴别需要时，可改用溶液法测定光谱后进 行比对。 2 、制剂的鉴别 USP 、BP 已广泛采用IR 法鉴别制剂，ChP2010 也收载了制剂的IR 鉴别法。与原料药 的IR 鉴别法相比，制剂的鉴别一般需采取提取分离、经适当干燥后再压片绘制图谱。提取 时应选择适宜的溶剂，以尽可能减少辅料的干扰，并力求避免导致可能的晶型转变。 制剂采用红外光谱鉴别时，①辅料无干扰，待测成分的晶型不变化，此时可直接与原料 药的标准光谱进行比对；②辅料无干扰，但待测成分的晶型有变化，此种情况可用对照品经 同法处理后的光谱比对；③待测成分的晶型不变化，而辅料存在不同程度的干扰，此时可参 照原料药的标准光谱，在指纹区内选择3～5 个不受辅料干扰的待测成分的特征谱带，以这 些谱带的位置（波数值）作为鉴别的依据。鉴别时，实测谱带的波数误差应小于规定值的 0.5% 。④若待测成分的晶型有变化，辅料也存在干扰