三种胡蜂幼虫的营养成分、褐变机理及其抑制研究.pdfVIP

摘要 摘要 胡蜂隶属于昆虫纲(Insecta)膜翅目(Hymenoptera)细腰亚目(Apocrita)，是胡蜂总科 (Vespoidea)昆虫的总称。胡蜂幼虫具有很高的营养价值和药用保健价值，开发利用前景广 阔。但是目前大多数胡蜂幼虫的营养成分尚不明确，在加工运输过程中发生褐变的原因 也不清楚。因此，本论文检测了夜食蜂、金环胡蜂和黄脚胡蜂幼虫的营养成分及核苷酸 含量，并判定三种胡蜂幼虫的褐变类型，然后通过抗坏血酸和超高压来抑制三种胡蜂幼 虫酚氧化酶的活性。为今后胡蜂幼虫产品的开发与利用提供理论基础。本论文的主要结 4 果包括以下 个部分： (1) 采用国标方法对三种胡蜂幼虫的营养成分及核苷酸进行分析。结果显示粗蛋白含 量(%)分别为53.47、56.36 和51.29；粗脂肪含量(%)分别为21.98、20.53 和22.96；铁含 量(mg/100g)分别为10.63、10.90和10.11；锌含量(mg/100g)分别为8.370、9.550和7.170； 硒含量(mg/100 g)分别为0.017、0.020 和0.015；维生素E 含量(mg/100g)分别为2.477、 2.377 和2.535；维生素B 含量(mg/100 g)分别为0.174、0.125 和0.211；维生素B 含量 1 2 (mg/100g) 2.235 2.082 2.291 (EAA/TAA) 分别为 、 和 ；必需氨基酸与总氨基酸的比值 分别 0.360 0.361 0.370 (EAA/NEAA) 0.563 为 、 和 ；必需氨基酸与非必需氨基酸的比值 分别为 、 0.565和0.590；多不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比值(PUFA/SFA)分别为0.260、0.267和 0.263；n-6/n-3 多不饱和脂肪酸的比值(n-6/n-3PUFA)分别为0.863、0.994 和0.803；次黄 嘌呤核苷酸(IMP)含量均远远高于鸟嘌呤核苷酸(GMP) (p0.05)。 (2) 利用紫外分光光度法对三种胡蜂幼虫的粗酶液进行全波长扫描，结果显示最大吸 290nm 288nm 287nm 收波长分别在 、 和 处。然后碱溶酸沉法去除粗酶液中蛋白质后， 上清液放置 12h 褐变度基本不变化。上述结果表明，幼虫褐变与蛋白质有关，是酶促褐 变。进一步利用Native和非还原SDS电泳技术从粗酶液中分离出多种蛋白 质，并通过L-DOPA 活性染色筛选出褐变条带。最后利用LC-MS鉴定褐变条带，结果显 示三种胡蜂幼虫的褐变条带拥有同一个蛋白质，该蛋白为胡蜂属(PolistesCanadensis)的酚 氧化酶(phenoloxidase2-like)，分子量为80.1，序列号为XP_014613621.1。 (3) 抗坏血酸对三种胡蜂幼虫酚氧化酶(PO)的影响。抗坏血酸对三种胡蜂幼虫PO IC50 0.2277% 0.2626% 0.2319% w/w 抑制的 值分别是 、 和 （ ）。当抗坏血酸的添加量达到 I 哈尔滨商业大学硕士学位论文 0.5% （w/w）时，对夜食蜂和金环胡蜂幼虫PO 的抑制率分别达到96.61%和93.2%，对黄 脚胡蜂幼虫PO 的抑制率达到100%。 (4) 超高压对三种胡蜂幼虫PO 的影响。压强方面，无论保压时间设置为5min 或者 15min，只要压强在低范围 （100MPa-200MPa）内，不仅没有钝化三种胡蜂幼虫的PO