色氨酸-2,3-双加氧酶-2抑制剂改善慢性脑低灌注大鼠的空间学习记忆能力及机制研究.pdfVIP

（本声明的版权归山西医科大学所有，,未经许可，任何单位及任何个人不得擅自使用） 目 录 中文摘要I 英文摘要 Ⅲ 前 言 1 1 材料与方法 3 1.1 动物与分组 3 1.2 主要试剂/仪器 3 1.3 实验过程 3 1.4 统计学分析 7 2 结 果 8 2.1 三组大鼠Morris 水迷宫行为学测试结果比较 8 2.2 三组大鼠小脑和海马TDO2 蛋白表达的比较 8 2.3 三组大鼠小脑和海马TDO2-mRNA 表达的比较 9 2.4 三组大鼠的KYN 、KYNA、QA、色氨酸表达比较 10 3 讨 论 11 4 结 论 13 参考文献 14 综 述 17 致 谢25 个人简介 26 山西医科大学硕士学位论文 色氨酸-2,3-双加氧酶-2 抑制剂改善慢性脑低灌注大鼠的空间 学习记忆能力及机制研究 摘 要 目的： 观察慢性脑低灌注致血管性认知障碍的大鼠模型中犬尿氨酸通路限速酶-色氨 酸-2,3 双加氧酶 2 （Tryptophan-2,3-dioxygenase 2 ，TDO2 ）及该模型中色氨酸及其 经犬尿氨酸通路代谢物质犬尿氨酸（Kynurenine, KYN ）、犬尿喹啉酸（Kynurenic acid, KYNA ）和喹啉酸(Quinolinic acid, QA)表达情况，同时观察TDO2 抑制剂别嘌醇能 否改善模型鼠的空间学习记忆，这种作用是否通过改变TDO 、色氨酸、KYN 、KYNA 或QA 的水平来实现。 方法： 成年健康雄性Sprague Dawley （SD）大鼠，采用随机数字法分为：假手术组、 手术组和 TDO 抑制剂组。手术组和抑制剂组采用改良结扎双侧颈总动脉法制备慢 性脑低灌注致血管性认知障碍大鼠模型，假手术组仅切开组织并分离组织及血管但 不结扎血管。行为学检测也就是空间学习记忆能力用Morris 水迷宫；三组大鼠海马 和小脑 TDO-2 蛋白的表达用 Western-Blot 法检测；三组大鼠海马和小脑 TDO2 mRNA 的表达采用 RT-PCR 法检测。采用酶联免疫吸附剂测定（Enzyme- linked immunosorbent assay，ELISA ）法检测各组大鼠的海马和小脑的色氨酸、KYN 、KYNA、 QA 的表达。 结果： 与假手术组比较，手术组第 1，2 ，5 天的逃避潜伏期延长，海马及小脑TDO2 蛋白表达增加，海马QA 表达增加，KYN 、KYNA 及色氨酸表达无统计学差异；与 手术组相比，TDO 抑制剂组第 1，4 ，5 天逃避潜伏期缩短， 海马和小脑的 TDO2 I 山西医科大学硕士学位论文 蛋白表达减少，小脑TDO2mRNA 表达增加，海马QA 表达减少，KYN 、KYNA 及 色氨酸表达无统计学差异。 结论： 在慢性脑低灌注致血管性认知障碍的发病过程中有犬尿氨酸通路的参与， 主要是TDO 和QA 参与其中；犬尿氨酸通路限速酶TDO 的抑制剂别嘌醇，能 够改善血管性认知障碍大鼠模型的空间学习和记忆能力，而这一改善可能是通 过降低海马及小脑 TDO2 的表达，减少海马QA 表达来实现的，同时还不干预 色氨酸、KYN 、KYNA 的表达。 关键词：慢性脑低灌注；色氨酸-2,3-双加氧酶2 ；血管性认知障碍；犬尿氨酸通路 II 山西医科大学硕士学位论文 Tryptophan-2,3-dioxygenase-2 inhibitors improve cognitive impairment and its pathogenesis in rats with ch