LC-MS_MS法检测干血片中3种B族维生素方法研究及两所医院儿童末梢全血3种B族维生素水平分析.pdf

目 录 中文摘要I 英文摘要 III 常用缩写词中英文对照表 V 前 言 1 第一部分 LC-MS/MS 分析干血片中维生素B 、B 、B 方法学建立 3 1 2 6 1 仪器、试剂、方法 3 2 结 果 9 3 讨 论 19 4 结 论 20 第二部分 北京和西宁两所医院儿童3 种B 族维生素的水平 21 1 对象与方法 21 2 结 果 23 3 讨 论 31 4 结 论 33 参考文献 34 综述 37 致 谢 49 个人简介 50 山西医科大学硕士学位论文 LC-MS/MS 法检测干血片中3 种B 族维生素方法研究及两所 医院儿童末梢全血3 种B 族维生素的水平分析 摘 要 目的： 建立一种能同时定量检测全血干血斑中维生素B 、B 、B （VitB 、VitB 、VitB ） 1 2 6 1 2 6 含量的高效液相色谱- 串联质谱技术 （LC-MS/MS ）方法，完成系统的方法学确证。分 析及比较北京和西宁地区两所医院 140 例 0～7 岁儿童全血中维生素B1 （硫铵素）、 维生素B2 （核黄素）、维生素B6 （磷酸吡哆醛）的营养状况，以期为两地儿童保健 工作提供现实依据。 方法： 应用ACE5 C8 色谱柱分离3 种目标待测物，电喷雾离子源，正离子模式，多反 应监测模式，优化质谱参数及流动相条件，实现5 分钟内分离3 种目标维生素。依据 美国食品药品监督管理局标准(Food and Drug Administration, FDA)对分析方法确证要 求，系统考察了该方法线性范围、灵敏度、准确度、精密度、回收率、稳定性，以及 固态干血斑与同源液态全血中目标维生素检测值一致性。系统方法学确证完成后，随 机选取2016 年8 月在首都儿科研究所、青海省妇女儿童医院门诊就诊，排除营养元 素缺乏及罹患血液系统疾病的0～7 岁140 例儿童为研究对象，其中北京地区72 例， 西宁地区68 例；采集末梢全血40μL 制备成全血干血斑。应用上述经过系统方法学考 评的定量方法对2 个地区儿童的干血斑中3 种B 族维生素水平进行定量分析和比较。 结果： VitB 、VitB 、VitB 线性范围分别为0.5~ 100 ng/ml，0.2~40 ng/ml, 0.5~ 100 ng/ml。 1 2 6 最低定量限分别为 0.5, 0.2, 0.5 ng/mL 。准确度（RE% ）分别为-5.99%~0.97%,- 5.15%~1.33%, -7.55%~5.47% 。批内精密度分别为 3.22%~8.26%, 1.64%~ 1.30%, 1.72%~7.53%。批间精密度分别为0.29%~13.11%，0.19%~8.49%, 0.50%~10.80% 。加 I 山西医科大学硕士学位论文 标回收率分别为97.65%~111.15%, 98.37%~103.3, 80.67%~90.50% 。VitB 、VitB 、VitB 1 2 6 在室温存放30 天内的8 次重复检测中，检测值相对标准偏差小于15%，表明干血斑 中3 种待测 B 族维生素在室温条件下维持稳定。应用