耐盐碱细菌筛选与生物菌肥对盐碱地作物的影响.pdfVIP

目录 中文摘要 1 Abstract3 1 前言6 1.1研究背景6 1.2 盐碱地对植物的危害6 1.3盐碱地的综合利用7 1.4 微生物制剂在盐碱地上的应用研究进展8 1.5耐盐碱微生物的种类10 1.6微生物耐盐碱机理10 1.6.1 渗透调节10 1.6.2 吸收钾离子排出钠离子10 1.6.3 细胞膜作用10 1.7全基因组测序分析挖掘功能基因11 1.7.1基因组功能原件11 1.7.2 蛋白编码基因功能注释11 1.8选题依据、研究内容与技术路线11 1.8.1选题依据11 1.8.2 研究内容11 1.8.3技术路线12 2 材料与方法 12 2.1试验材料12 2.1.1试验菌株12 2.1.2 培养基13 不同LB 培养基 13 蛋白酶产生菌鉴定培养基13 解磷细菌鉴定培养基13 解钾细菌鉴定培养基13 生长素产生菌鉴定培养基13 铁载体产生菌鉴定培养基13 2.1.3试验仪器14 2.1.4 主要试剂14 2.2 试验方法14 2.2.1菌种鉴定14 形态鉴定15 生理生化鉴定15 细菌DNA 提取15 序列扩增15 序列测定15 2.2.2 菌株功能测定15 菌株产蛋白酶能力鉴定15 菌株溶磷 （无机磷）解磷 （有机磷）能力的鉴定15 菌株解钾能力的鉴定16 菌株产IAA 能力的鉴定 16 菌株产铁载体能力的鉴定16 耐盐能力测定16 耐碱能力测定16 2.2.3盆栽试验16 土壤处理17 播种17 出苗率及胁变指标监测17 测定农艺性状18 2.2.4 高地芽孢杆菌6WW6全基因组分析挖掘耐盐基因18 2.2.5微生物菌肥对大田作物的影响18 田间试验地点与供试土壤18 田间试验设计19 玉米小麦产量测定21 小麦根际土高通量测序21 2.2.6数据分析22 3 结果与分析22 3.1菌种鉴定结果22 3.1.1形态鉴定22 3.1.2 生理生化鉴定24 3.1.3 菌株16SrRNA 序列分析24 3.2 菌种功能26 3.2.1 菌株产蛋白能力26 3.2.2 菌株溶磷 （无机磷）解磷 （有机磷）能力27 3.2.3 菌株解钾能力28 3.2.4 菌株产IAA 能力28 3.2.5 菌株产铁载体能力28 3.2.6 菌株耐盐能力29 菌株6R8耐盐性29 菌株6CW15耐盐性30 菌株6WW6耐盐性31 菌株6R3耐盐性32 菌株30-04J-1耐盐性33 菌株30-04J-2 耐盐性34 菌株耐碱性35 3.3盆栽试验验证菌株应用潜力36 3.3.1出苗率及胁变指标监测36 玉米出苗率36 种子丙二醛含量38 3.3.2 盆栽植株性状40 玉米农艺性状40 玉米根系扫描结果51 3.4 高地芽孢杆菌6WW6基因组测序分析挖掘功能基因54 3.4.1与生长素相关的促生基因预测55 3.4.2 与溶磷相关的促生基因预测55 3.4.3 与产生铁载体相关的促生基因预测55 3.4.4 与耐盐性相关的基因预测56 3.5 菌肥田间试验57 3.5.1玉米产量结果57 盐分3‰地块玉米各产量构成指标58 盐分4‰地块玉米各产量构成指标59 盐分5‰地块玉米各产量构成指标59 3.5.2 小麦产量结果60 3.5.3 小麦根际细菌群落结构分析62 Alpha 多样性分析62 群落结构分析64 4 讨论66 4.1耐盐碱细菌的鉴定以及耐盐碱特性66 4.2 耐盐碱促生菌对不同土壤环境下玉米幼苗生长的影响67 4.3 高地芽孢杆菌 （Bacillusaltitudinis）6WW6基因组测序68 4.4 生物菌肥对盐碱地中作物的影响69 5 结论70 6 参考文献73 7 附录A：基因组测序部分结果79 8 附录B：土壤细菌多样性部分结果87 9 致谢90 山东农业大学硕士学位论文 中文摘要 盐碱地资源是我国重要的土地资源。盐碱地面积巨大，如何开发和利用一直是一个 热点问题。通过植物根际促生菌 （PGPR）制成的微生物肥料在提高盐碱地的利用率等 方面发挥着重要作用。本研究丰富了耐盐碱植物根际促生菌资源库，增加了对耐盐碱植 物根际促生菌的认识，为开发新型的适用于盐碱地的微生物