荔枝草和三种多酚类单体物质对斑马鱼肝损伤的修复作用机理研究.pdfVIP

摘 要 斑马鱼具有许多独特的特征，如体积小，外部受精，快速发育和对药物施用 的极端敏感性等，这是筛选和评估药物的理想模型。在疾病研究中肝损伤和炎症 反应是发生率较高的疾病，研究关于治疗肝损伤及抗炎的药物有很大的研究前 景。 本文利用硫代乙酰胺 （TAA）诱导斑马鱼肝损伤模型和脂多糖 （LPS）诱导 SPEE BA 的斑马鱼炎症模型评价了荔枝草乙醇提取物 （ ）、黄芩素 （ ）、槲皮素 （Que）和绿原酸 （CGA）的抗氧化、抗炎及保肝作用。采用了酶活测定、气相 - GC-MS Westernblot 色谱 质谱联用仪（ ）定量分析、免疫荧光染色、蛋白质印迹（ ）、 琼脂糖凝胶电泳、PCR 及Q-PCR 等方法。主要研究结果如下： 1. 荔枝草对LPS 刺激的斑马鱼胚胎具有抗氧化作用和抗炎作用。其次， SPEE 可显著减轻成年斑马鱼TAA 诱导的肝空泡，脂质积聚和肝纤维化。同时， SPEE NO ApoE PPAR-γ 暴露后 含量和脂质代谢相关基因 和 含量显著下调。从机 制上讲，SPEE 可以减少肝细胞凋亡，促进TAA 诱导模型中转录因子 （Nrf2）从 细胞核向细胞质的转运。最后，SPEE 可以在H O 刺激的条件下调节各种炎性细 2 2 胞因子和先天免疫相关基因。 2. 黄芩素改善了TAA 诱导的斑马鱼肝脏发育毒性。通过酶活测定发现黄芩 素降低氧化应激水平，炎症因子检测发现黄芩素具有抗炎作用。Western Blot 结 果显示凋亡蛋白表达增加，抗凋亡蛋白表达减少现象。用PCNA 染色发现增殖 细胞减少等情况。从机制上讲，黄芩素通过提高p38 和ERK1/2 来促进PPARα 活化，进而调节肝脏发育。 3. 通过体长，肝脏，胰腺等大小检测，发现槲皮素能够有效促进斑马鱼发 育。同时通过酶活测定和炎症基因检测，本研究发现槲皮素具有抗氧化和抗炎作 用。在研究槲皮素对斑马鱼发育迟缓的抗发育迟缓机制时，证明了槲皮素从调节 Wnt 信号通路方面来促进斑马鱼肝脏发育。 4. 绿原酸能够有效促进斑马鱼肝脏发育和具有抗氧化抗炎作用。在研究绿 原酸治疗肝脏发育不良的分子机制时，发现绿原酸能够通过调节Wnt 信号通路 来治疗TAA 导致的斑马鱼肝脏发育不良。 结果表明荔枝草、黄芩素、槲皮素和绿原酸具有抗氧化、抗炎活性和保肝作 用。为进一步开发新药和保健食品提供研究基础。 关键词：荔枝草；黄芩素；槲皮素；绿原酸；抗炎；保肝作用 I Abstract Zebrafish have many unique characteristics such as small size, external fertilization,rapid development, and extreme sensitivity to drug administration,which is an ideal model for screening and evaluating drugs. Liver injury and inflammatory response are diseaseswith ahigh incidence in diseaseresearch.Research on drugs for treatingliver injury and anti-inflammatoryhasgreatresearchprospects. In this paper, thioacetamide (TAA) -induced zebra liver injury model and lipopolysaccharid