板蓝根颗粒开发方案 .pptVIP

1.5 观察与检查 1.5.1 观察指标:用于观察板蓝根对感染小鼠肺组织的保护作用的小鼠共观察14 d，记录小鼠的死亡数及生存天数，并计算存活率及延长生命率。用于观察板蓝根对甲型H1N1 流感病毒感染小鼠死亡的保护作用的小鼠在第5 天安乐，取肺组织留做病理检查。 1.5.2病理学检查:无菌取小鼠的肺，福尔马林溶液中固定24 h，脱水，石蜡包埋、切片，常规HE 染色，显微镜下下观察其病理变化。 1.6 结果 1.6.1板蓝根颗粒对甲型H1N1 流感病毒感染小鼠存活率的影响 实验结果提示，板蓝根可明显降低甲型H1N1 流感病毒感染小鼠的死亡率，与模型组比较差异显著( P 0. 05 ) ，提示板蓝根对甲型H1N1 流感病毒感染的小鼠有保护作用（表1）。 1.6.2板蓝根颗粒对甲型H1N1 流感病毒感染小鼠平均生存天数及延长生命率的影响 实验结果提示，板蓝根可明显可延长小鼠的存活天数，与模型组比较差异显著，提示板蓝根甲型H1N1 流感病毒感染的小鼠有保护作用( 表2) 二、药理研究 1.6.3 病理学检查 空白对照组动物肺脏均未见明显病理改变。阳性对照( 模型) 组动物感染甲型H1N1 病毒第5 天后肺脏呈弥漫性肺炎改变；阳性药( 达菲) 组部分动物(4 例/10 例) 肺脏病变范围较模型组小，病变程度与模型组基本一致，其余动物(6 例/10 例)与模型组病变范围与程度基本一致；板蓝根颗粒组部分动物( 2 例/10 例) 肺脏病变范围较模型组小，病变程度与模型组基本一致，但其数量较阳性药( 达菲) 组少，其余动物(8 例/10例) 与模型组病变范围与程度基本一致。具体病变范围结果见表3 二、药理研究 1.7 讨论 板蓝根组可明显延长甲型H1N1 病毒感染小鼠的存活天数，提高存活率，与模型组比较差异显著(P 0. 05) ，提示板蓝根颗粒对甲型H1N1 病毒感染致肺部病变具有减轻作用。 二、药理研究 2 板蓝根抗病毒成分表告依春在大鼠体内的药代动力学 2.1 动物：SD 大鼠, 雌雄各半, 体重250 ～ 300 g 2.2 分组：板蓝根溶液组 2.3 剂量：表告依春6.8 mg/kg 2.4 方法 2.4.1血浆中表告依春的测定 2.4.1.1 　色谱条件　 2.4.1.2 　血浆样品处理　 2.4.1.3 　血浆中表告依春的工作曲线制备　 2.4.1.4 　回收率和精密度试验　 2.4.2动物试验 SD 大鼠6只, 禁食12 h , 可自由饮水, 给药剂量按表告依春6.8 mg/kg 进行给药。灌胃体积1 mL/100 g 体重。给药前及给药后0.083 , 0.25 , 0.5 , 0.75 , 1 , 2 , 3 , 4 , 6 ,8 , 10 , 12 , 15 h 经眼球后静脉丛取血0.3 mL, 置肝素化试管中, 离心取血浆0.1 mL 进行分析。给药4 h后腹腔补充生理盐水1 mL/100 g 体重。 二、药理研究 二、药理研究 2.4.2　数据处理 用矩量法求算药代动力学参数, 即AUC 用梯形面积法计算, tmax和cmax用实测值进行计算, 用末端相浓度(3 个点)对时间直线回归后求得末端消除速率常数λZ , 从而计算t1/2 。并用t 检验进行统计。 3 毛细管电泳法研究板蓝根水提物抗流感病毒的作用机制 显微镜检判定板蓝根不同处理方式下的红细胞经流感病毒侵染后的形态学差异, 通过毛细管电泳结合显微镜镜检、血凝滴度指标进一步阐述板蓝根抗流感病毒的生化机制。 结果:经过板蓝根保护过的细胞, 能阻止病毒对细胞的吸附, 推测其可能是通过与细胞膜的作用来保护细胞。 结论:板蓝根通过结合到细胞膜上而起到保护细胞的作用, 有效抑制了流感病毒对细胞的结合, 从而达到抗病毒的目的。 二、药理研究 结论：板蓝根颗粒对感冒有一定的治疗效果。 三、毒理评价 急性毒性、 长期毒性、 特殊毒性（致畸、致癌、致突变）、 局部用药毒性、 过敏试验、 刺激性试验、 溶血试验 药物依赖性试验 三、毒理评价 1板蓝根多糖的毒性试验 1. 1 材料 1.1. 1 板蓝根多糖的提取 按照常规水煮醇沉法进行提取,使用前用双重蒸馏水配制成1 ml 含多糖0． 067 g，高压灭菌，4℃冰箱保存备用。 1. 1. 2 试验动物 清洁级昆明小白鼠。体重18 ～ 22 g，鼠龄为6 ～ 8 周。雌雄各半。 1.2 方法 1.2.1 急性毒性实验及免疫器官指数的测定 将板蓝根多糖用双蒸水配制成5 个浓度，选取30 只小白鼠( 体重为20 ± 2 g) 分成6组，每组五只，第六组为空白对照组，注射生理盐水