呼吸道感染的现状及检测进展 .pptVIP

呼吸道感染诊断的临床需求 临床需求 时间迅速：能够在开始治疗前出结果 基层诊疗：操作简便，价格合理 区分定植菌和实际感染 检测对象 门诊：初次治疗失败， 群居发病（隔离传染患者） 住院：临床症状不够典型 常规检查结果无指向性 重症/ICU 呼吸道疾病现状 儿科最常见疾病 为什么要早期全面检测呼吸道病原体 治疗针对性强，预后取决于种类 病毒治疗有时效性 避免抗生素的滥用及病毒传染 病毒自限，检测意义不大？ 常见呼吸道病原体 常见呼吸道病原体 不同发病地点病原体谱存在差异 美国感染病学会/美国胸科协会 成人社区获得性肺炎诊断治疗指南（2007） 不同年龄儿童社区获得性肺炎的病原体谱（1） 根据年龄能很好地预示儿童CAP的可能病原 病毒是婴幼儿CAP常见病原，也是儿童CAP病原学区别于成人的重要特征，病毒病原的重要性随年龄增长而下降。 年幼儿CAP 50％由病毒病原引起，年长儿常由细菌、肺炎支原体感染所致。 呼吸道合胞病毒是引起CAP的首位病毒病原，其次是副流感病毒1-3和流感病毒A/B。 肺炎链球菌是儿童CAP最常见细菌病原。 不同年龄儿童社区获得性肺炎的病原体谱（2） 根据年龄能很好地预示儿童CAP的可能病原 MP不仅是学龄期和学龄前期儿童CAP常见病原，在1～3岁婴幼儿中亦不少见。肺炎衣原体多见于学龄期和青少年。此外，嗜肺军团菌可能是重症CAP的独立病原或混合病原之一。 年龄越小，越易发生混合感染，婴幼儿常见有病毒/细菌、病毒/病毒混合感染，年长儿多为细菌和非典型病原混合感染。 不同年龄儿童社区获得性肺炎的病原体谱 28天~3月龄 病原种类 常见病原 少见病原 细菌 肺炎链球菌 非发酵革兰氏阴性菌 大肠埃希菌 百日咳杆菌 肺炎克雷伯菌 流感嗜血杆菌(b型、不定型） 金黄色葡萄球菌 卡他莫拉菌 非典型病 沙眼衣原体 病毒 呼吸道合胞病毒 巨细胞病毒 副流感病毒(I型、Ⅱ型、Ⅲ型) 流感病毒(A型、B型) 腺病毒 人类偏肺病毒 儿童社区获得性肺炎管理指南(2013修订) 不同年龄儿童社区获得性肺炎的病原体谱 ＞3月龄～5岁 病原种类 常见病原 少见病原 细菌 肺炎链球菌 肺炎克雷伯菌 流感嗜血杆菌(b型、不定型） 大肠埃希菌 卡他莫拉菌 结核分枝杆菌 金黄色葡萄球菌 非典型病 肺炎支原体 嗜肺军团菌 肺炎衣原体 病毒 呼吸道合胞病毒 鼻病毒 腺病毒 人类偏肺病毒 副流感病毒(I型、Ⅱ型、Ⅲ型) 肠道病毒 流感病毒(A型、B型) 人禽流感病毒 新型冠状病毒 EB病毒 麻疹病毒 儿童社区获得性肺炎管理指南(2013修订) 不同年龄儿童社区获得性肺炎的病原体谱 5~15岁龄 病原种类 常见病原 少见病原 细菌 肺炎链球菌 化脓性链球菌 金黄色葡萄球菌 结核分枝杆菌 流感嗜血杆菌(b型、不定型） 非典型病 肺炎支原体 嗜肺军团菌 肺炎衣原体 病毒 流感病毒(A型、B型) 腺病毒 EB病毒 新型冠状病毒 人禽流感病毒 儿童社区获得性肺炎管理指南(2013修订) 病原学诊断的临床应用 病原体的检测方法 抗原检测 微生物检测系统 间接免疫荧光马赛克组合 多重核酸检测 呼吸道病原体检测方法 特异性抗体检测 病毒抗原的测定 细菌培养和药敏 分子生物学 优点 缺点 病毒分离培养 特异性高，金标准 耗时，敏感性低，技术要求高 监测耐药情况 样本易污染，结果影响大 感染证据，检测快速 敏感性低，不能区分污染/定植 受抗体动力学影响 早期诊断，特异及敏感性高 敏感性高，检测快速 实验室条件要求高，不宜推广 血 清 诊 断 血清学 IFA ELISA 补体结合实验 凝集法 血凝抑制 优点 特异性高 大样本量检测 早期诊断 敏感 操作简便 缺点 假阴性 假阳性 不特异 不能指示 现症感染 不特异 部分病毒适用 IgG IgA IgM 免疫动力学 病原体 潜伏期 IgM出现时间 持续时间 肺炎支原体 14~21天 一周左右 3~6个月 流感病毒（AB） 1~7天 一周左右 2~3个月 呼吸道和胞病毒 3~7天 一周左右 2~3个月 腺病毒 2~14天 一周左右 2~3个月 肺炎衣原体 ~30天 2~3周左右 2~6个月 嗜肺军团菌 2~10天 一周左右 3~6个月 间接免疫荧光（IFA）原理 病原体涂片：细菌、真菌、弓形体和寄生虫 病原体感染细胞：病毒、支原体和衣原体等 冰冻组织切片：寄生虫 载片 包被有抗原的基质 特异抗体 荧光标记的 抗人IgM抗体 包被基质 间接免疫荧光法检测的优势 标准化 高效率 高特异性 技术成熟，重复性好，可自动化 适用范围广 基质制备：无生化提纯步骤，抗原接近真实三维构象 标准判读：典型荧光模式，避免非特异荧光干扰 基质组合