无菌室无菌操作及的风险评估.pptVIP

无菌试验及无菌操作 对灭活前样品无菌试验不合格的分析 LOGO 目录 」.无菌试验 2.无菌譟作 (一)无菌试验 无菌试验:是无菌的制剂、原料 辅料及其他品种是否无菌的一种 检查方法,同时指出“若供试品 符合无菌检查法的规定,仅表明 了供试品在该检验条件下未发现 微生物的污染”。 (一)无菌试验 培养基的制备及培养条件 培养基可按以下处方制备,亦可使用按 该处方生产的符合规定的脱水培养基。配制 后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。制备好 的培养基应保存在2℃~25℃、避光的环 境,若保存于非密闭容器中,一般在三周内 使用;若保存于密闭容器中,一般可在一年 内使用 (一)无菌试验 常用培养基 硫乙醇酸盐流体 培养基 改良马丁培养基 营养琼脂培养基 硫乙醇酸盐流体培养基 ◇酪胨(胰酶水解)15.0g酵母浸出粉5.0g 令葡萄糖5.0g氯化钠2.5g 冷L-胱氨酸0.5g新配制的0.1%刃天青溶液1.0ml 令硫乙醇酸钠0.5g琼脂0.75g 令(或硫乙醇酸)(0.3m)水1000ml 除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微温溶解,调节pH为弱 碱性,煮沸,滤清,加入葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,调节pH值使灭 菌后为7.1±0.2。分装至适宜的容器中,其装量与容器高度的比例应 符合培养结束后培养基氧化层(粉红色)不超过培养基深度的12。灭 菌。在供试品接种 培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5 否则,须经100℃水浴加热至粉红色消失(不超过20分钟),迅速冷 却,只限加热一次,并防止被污染。 硫乙醇酸盐流体培养基置30℃~35℃培养。 返回 改良马丁培养基 今2.改良马丁培养基 令胨5.0g磷酸氢二钾10g 令酵母浸出粉2.0g硫酸镁0.5g 令葡萄糖20.0g水1000m 除葡萄糖外,取上述成分混合,微温溶解,调节 pH值约为6.8,煮沸,加入葡萄糖溶解后,摇匀, 滤清,调节值使灭菌后为64±02,分装, 灭菌。 改良马丁培养基置23℃~28℃培养。 返回 营养琼脂培养基 令胨10.0g氯化钠5.0 令牛肉浸出粉3.0g水1000m 取上述成分混合,微温溶解,调节pH为弱碱性 煮沸,滤清,加入14.0q琼脂,调节pH值使灭菌 后为7.2±0.2,分装,灭菌。 返回 (二)无菌操作 无菌操作原则 明确基本概念 进行无菌操作时,应首先明确无菌区、非无菌区、 无菌物品的概念。 8无菌区:指经灭菌处理且未被污染的区域 非无菌区:指未经灭菌处理,或虽灭菌处理但又 被污染的区域。 无菌物品:指通过物理或化学的方法灭菌后保持 无菌状态的物品。