2017 2018高中生物 第一章 无菌操作技术实践 第2课时 分离特定的微生物并测定其数量同步备课 苏教版选.pptVIP

(2) 统计菌落数目 甲、乙两位同学用涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应 稀释倍数为 10 6 的培养基中，得到以下两种统计结果。 ①甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为 230 ，该同学的 统计结果是否真实可靠？为什么？ 答案 不真实。 为增加实验的说服力与准确性，应设置重复实验，在同一 稀释度下涂布 3 个平板，统计结果后计算平均值。 答案 ②乙同学在该浓度下涂布了 3 个平板，统计的菌落数分别为 21 、 212 、 256 ，该同学将 21 舍去，然后取平均值。该同学对实验结果的处理是否 合理？为什么？ 答案 不合理。微生物计数时，如果实验中出现重复实验的结果不一致 的情况，应分析实验过程中可能的影响因素，找出差异的原因，而不能 简单地舍弃后进行计数。 答案 ③某同学在三种稀释度下吸取 0.1 mL 的菌液涂布平板，统计菌落数， 得到以下的数据，试计算 1 g 样品的活菌数。 平板 稀释度 平板 1 平板 2 平板 3 10 4 320 360 356 10 5 212 234 287 10 6 21 23 18 答案 10 5 的稀释度下取 0.1 mL 涂布的三个平板上的菌落数在 30 ～ 300 之间，计算其平均值为 (212 ＋ 234 ＋ 287)/3 ≈ 244 。进一步可以换算出 1 g 样 品中活菌数为 (244 ÷ 0.1) × 10 5 ＝ 2.44 × 10 8 。 答案 ④为什么统计的菌落数比活菌的实际数目低？ 答案 当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 答案 归纳总结 分离尿素分解菌操作中的注意事项 (1) 在实验操作中，每个步骤都要注意无菌操作，以防培养基被污染，影响 实验效果。 (2) 样品稀释液的最佳浓度为获得每个平板上有 30 ～ 300 个菌落，这个稀释度 细菌一般为 10 4 、 10 5 、 10 6 倍稀释液，放线菌一般为 10 3 、 10 4 、 10 5 倍稀释液， 真菌一般为 10 2 、 10 3 、 10 4 倍稀释液。 (3) 为排除非测试因素 ( 培养基 ) 的干扰，实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基进行 空白对照。 (4) 每一稀释倍数的菌液都至少要涂布 3 个平板，作为重复实验，求其平均值， 若其中有菌落数与其他平板悬殊过大的，需要对该平板重新制作。 拓展应用 3. 下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是 A. 用全营养牛肉膏蛋白胨培养基筛选大肠杆菌 B. 用高 NaCl 的培养基筛选抗盐突变菌株 C. 含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株 D. 利用高温条件筛选耐热的 Taq 细菌 答案 解析 解析 若对大肠杆菌进行计数，则需要用涂布平板法接种样品。 4. 自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将 它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定 的实验，请回答下列有关问题： (1) 实验步骤 ①制备稀释倍数为 10 2 、 10 3 、 10 4 、 10 5 、 10 6 的系列稀释液。 ②为了得到更加准确的结果，应选用 法接种样品。 ③适宜温度下培养。 答案 解析 涂布平板 (2) 结果分析 ①测定大肠杆菌数目时，在对应稀释倍数为 10 6 的培养基中，得到以下 几种统计结果，与事实更加接近的是 。 A. 一个平板，统计的菌落数是 230 B. 两个平板，统计的菌落数是 220 和 260 ，取平均值 240 C. 三个平板，统计的菌落数分别是 400 、 212 和 256 ，取平均值 289 D. 四个平板，统计的菌落数分别是 210 、 260 、 240 和 250 ，取平均值 240 答案 解析 解析 应选取多个菌落数相差不大的平板进行计数，取其平均值。 ②一同学在稀释倍数为 10 6 的培养基上测得平板上菌落数的平均值为 212 ， 那么每毫升样品中的菌落数约是 ( 涂布平板时所用的稀释液体积为 0.2 mL) 。 ③用这种方法测定菌体密度时，实际活菌数量要比测得的数量 ( 填 “ 多 ” 或 “ 少 ” ) ，因为 _________________________________________________ 。 答案