蛋白质一级结构的测定课件.pptVIP

　蛋白质一级结构的测定 蛋白质的一级结构指：蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序，包括二硫键的位置。组成一个蛋白质分子的多肽链的数目和多肽链中氨基酸的精确序列是蛋白质一级结构的两个重要方面。 其中最重要的是多肽链的氨基酸顺序，它是蛋白质生物功能的基础。 一级结构 ( Primary Structure ) 包括以下几方面内容： 　①多肽链的数目； 　②每条多肽链中氨基酸的种类、残 基数目和排列次序； 　③链内或链间二硫键的位置和数目。 蛋白质一级结构测定的策略 从蛋白质开始的蛋白质序列分析 从DNA开始推蛋白质氨基酸序列 质谱法测定蛋白质的一级结构 从蛋白质开始的蛋白质序列分析 测定的基本战略 测定一级结构的准备工作 测定一级结构的基本步骤 测定的基本策略 用两种裂解肽链的方法,分别得到裂解肽段； 分离提纯肽段,测出各个肽段的氨基酸序列； 对两套肽段序列比较,找出重叠肽,确定各肽段位置,拼凑整个肽链的氨基酸排序。 测定一级结构的准备工作 对样品纯度的要求 97% 对蛋白质分子量的测定 误差10% 测定分子中多肽链的数目与种类 蛋白质的氨基酸组成 蛋白质的配基 蛋白质的端基分析 测定一级结构的基本步骤 测定蛋白质分子中多肽链的数目 拆分蛋白质分子中的多肽链 测定多肽链的氨基酸组成 分析多肽链的N末端和C末端 断裂多肽链内的二硫键 多肽链断