蛋白质高效液相色谱技术精品课件.pptVIP

* 美国沃特世，安捷伦，日本的岛津公司 * 流动相参与样品与固定相之间的相互作用，使样品在流动相和固定相之间以不同的形式进行分配，根据被分离的样品和固定相的性质合理选择流动相显得至关重要。 常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液 调整弱酸，50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液 调整弱碱 * 为了使蛋白质的检测更加准确方便，人们尝试将HPLC 与其他分析技术联用。目前在蛋白质检测方面比较成功的联用技术主要有 * 这些蛋白质比较复杂，毛细管电泳可以作为HPLC很好的补充，有时单用HPLC无法分离的蛋白质，在毛细管电泳上可以很好的分离。 高效液相色谱法在蛋白质分离中的应用 高效液相色谱技术特点概述 1 HPLC系统各组分介绍； 2 流动相的要求及准备过程 3 5 4 HPLC色谱技术与其他技术联用 5 HPLC 应用举例 6 现状与展望 6 应用 范围广 高灵 敏度 高效 高压 分析速 度快 HPLC是近二十年来发展起来的一项新颖快速的分离技术。它是在经典液相层析法基础上，引进了气相层析的理论具有气相层析的全部优点。 根据分离机理蛋白质HPLC又可分为 1 2 4 3 高效凝胶过滤色谱(HPSEC) 高效离子交换色谱（HPIEC） 高效亲和色谱（HPAFC） 反向高效液相色谱（RP-HPLC） 高效液相色谱仪 常用的HPLC仪 Waters公司