蛋白质聚焦层析精品课件.pptVIP

L/O/G/O 蛋白质聚焦层析 定义 聚焦层析是一种操作简单、廉价的柱层析技术 其流动相为多缓冲液，固定相为多缓冲交换剂 利用层析过程中固定相偶联的具有两性解离功能的有机分子为配基，与流动相中某些两性物质发生等电聚焦反应而进行的一种分离方法 等电聚焦 聚焦层析 柱层析 发展 优点 有聚焦作用，蛋白峰尖、带狭，带宽度为0.04~0.05pH单位 在柱内自动形成pH梯度，不需要pH梯度装置 操作方便 分辨率高 4 1 2 3 近年来，由瑞典Pharmacia公司设计了 一种新的分离技术，叫做聚焦层析(Chromatofocusing) ， 其产品已经实现量产以及商业化 其优点如下： 关键技术 多缓冲液 多缓冲液离 子交换树脂 两种材料分别作为流动相以及固定相 发展了两类新材料 多缓冲液(Polybuffer) 属于两性电解质一类的缓冲液 含有多种缓冲液 用NaOH滴定的滴定曲线近似平滑的直线 该公司有Polyboffer96和Polybuffer74两种产品，即分别代表缓冲力范围为pH9-6和pH7-4 多缓冲液离子交换树脂(polybufferexehangers) 带有碱性缓冲基团的阴离子交换树脂 把带电基团通过醚键与Sepharose 6B的单糖连接的 也有两种产品：P