常用中药生物鉴定.pptVIP

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2020-09-17 发布于福建
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常用中药生物鉴定.ppt

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常用中药的生物鉴定常用中药的生物鉴定方法免疫鉴定法电泳鉴定法生物效价鉴定法单纯指标鉴定法细胞生物学鉴定法 DNA遗传标记鉴定法 mRNA差异显示鉴定法聚合酶链式反应 (Polymerase Chain Reaction) 简称PCR,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段可看作生物体外的特殊DNA复制。少量DNA样品快速扩增amp|fy技术 (invented by Kary Mullis won a Nobel Prize in Chemistry in 1993) 原理 Sequencing 1Oeyelus of HIepw: I: denaturation I inur oc ImrmmtmTmTmmn m ITITTTImTIFITT ITTITITTITITTTTTTTTTTITT iuumLLLILunLAL stop: annealing aLaiN I seconds 50c 4、÷f d minnie nf i y山uuuu山y PCR要件模板 Template 引物 Primers Small pieces of DNa Made up of 15 to 30 bases Binds the dNa at a specific region forward and reverse正向和逆向酶 Enzyme Tag DNA polymerase PCR核酸 Nucleotides Substrate, four deoxyribonucleotides(A, C,G,T) dNTP Dist H2O 117 ul 10X buffer 15 u dNTP Primer 1 3 ul Primer 2 3 u Tag polymerase 0.75 ul 200ul tube Pipette上下混合取出15u 不加模板的对照组剩下的加入3 ul Template DNA 用 pipette上下混合分装入tube15u/支标上1.5 C 54C56 62 55C Run Pcr 不加引物但有模板的对照加入1u模板DNA 15 ul template UW 1 ul TC 3 ul template(T) Pipette mix 15ul/tube 1/3/3/45 PC