病毒学课件：3病毒感染的诊断和防治.pptVIP

病毒感染的诊断和防治原则吉林大学基础医学院赵春燕 教授 一、标本的采集与送检 原则基本与细菌相似，但应注意： 1.标本用“双抗”或两性霉素B处理 2.低温保存，尽快送检 3.血清学诊断采双份血清 二、病毒的分离与鉴定 （一）病毒的分离培养 细胞培养（cell culture） 鸡胚接种（egg inoculation） 动物接种（animal inoculation）  1.动物接种 应用：尚无敏感细胞的病毒培养 动物：兔、鼠、黑猩猩、猴等 优点：结果易观察，可建立动物模型 缺点：有饲养条件要求，费用高， 动物对许多人类病毒不敏感 动物体内常带有潜伏病毒 2.鸡胚培养 采用孵化9～14天的鸡胚 绒毛尿囊膜（allantocherion） 痘苗病毒、人类疱疹病毒 尿囊腔（allantoic cavity） 接种部位 流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔（amniotic cavity） 流感病毒的初次分离 卵黄囊（yolk sac） 嗜神经病毒 3.细胞培养 单层细胞培养（monolayer cell culture） 分类 悬浮细胞培养（suspended cell culture） 原代细胞（primary cell） 细胞种类 二倍体细胞（diploid cell） 传代细胞系（continuous cell line） 病毒的细胞培养 特点：①对多种病毒敏感 ②生长能力有限, 获取成本高 ③可携带潜伏病毒 病毒在培养细胞增殖的指征 (1)细胞变化： ①CPE：细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等 (多数病毒)； ②形成多核巨细胞或称融合细胞 (麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等) ③在培养细胞中形成包涵体 (狂犬病病毒、麻疹病毒等) (4)细胞代谢改变 细胞代谢变化 pH值改变 空斑形成试验： 病毒数量 （三）新分离病毒的鉴定 核酸类型的测定 理化性状的检测 ：对脂溶剂的敏感性 耐酸性试验 血清学鉴定 基因测序和生物对比 三、病毒感染的血清学诊断 应用： ①采取标本分离病毒为时已晚； ②目前尚无分离此病毒的方法或难以分离的病毒； ③为证实所分离的病毒的临床意义； ④进行血清流行病学调查等。 1.中和试验（neutralizing test） 病毒＋中和抗体 病毒失去感染性 特点：特异性高，抗体维持时间长 应用：人群免疫情况的调查，临床诊断少用。 3.补体结合试验（complement fixation test） 用已知病毒可溶性补体抗原检测病人血清中相应的补体抗体。 特点：特异性低，抗体出现早，消失快 应用：近期感染指标 4. 凝胶免疫扩散试验 抗原抗体沉淀反应，简便、特异性与敏感性均较高。 用于诊断HBV与乙型脑炎病毒感染。 四、病毒感染的快速诊断 数小时内出结果 病毒颗粒 病毒成分（抗原或核酸） 早期抗体检测（IgM） （一）形态学检查 电镜和免疫电镜检查 普通光学显微镜检查 包涵体 （二）病毒蛋白抗原检查 1.免疫荧光技术 2.固相放射免疫测定 3.酶免疫技术 （三）特异性IgM抗体检测 可诊断急性感染 特异性IgM抗体：孕妇感染风疹病毒 EBV早期抗原抗体 第二节 病毒感染的预防 微生物及其代谢产物 生物制品 动物免疫血清 （biological products） 免疫细胞 细胞因子 防治和诊断感染性疾病 一、人工主动免疫 活疫苗（living vaccine） 灭活全病毒疫苗（inactivated vaccine） 亚单位疫苗（subunit vaccine） 化学提取或人工合成疫苗