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第 45 讲 生物技术在其他方面的应用
[ 考纲要求 ] 1. 植物的组织培养。 2.PCR 技术的基本操作和应用。 3. 蛋白质的提取和分离。
4. 从生物材料中提取某些特定的成分。 5. 实验: DNA的粗提取与鉴定。
考点一 植物组织培养
1. 植物组织培养的过程
脱分化 再分化
外植体 ――→ 愈伤组织 ――→ 幼苗― →移栽
植物组织培养常用的培养基是 MS培养基,一般需要添加生长素和细胞分裂素两种植物
激素。
2. 植物组织培养的实验操作
菊花的组织培养过程
制备 MS培养基 ( 配制母液、配制培养基、灭菌 ) →外植体消毒→接种→培养→移栽→栽
培。
月季的花药培养过程①过程:材料的选取→材料的消毒→接种和培养→鉴定和筛选。②影响花药培养的因素主要有材料的选择和培养基的组成。③要挑选完全未开放的花蕾,确定花粉发育时期最常用的方法是醋酸洋红法。
3. 影响植物组织培养的因素
(1) 菊花的组织培养,一般选择开花植株的茎上部新萌生的侧枝 ( × )
植物激素的浓度可影响细胞分化,但使用的先后顺序及比例不影响组织培养的过程
( × )
(3)pH 、温度和光照等也影响植物组织培养 ( √ )
易错警示 实验操作中易错的几个问题
材料的选取:菊花的组织培养实验中,应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝;月季的花药培养实验中,应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。
外植体消毒:所用消毒剂为体积分数为 70%的酒 精和质量分数为 0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是无菌水。
培养过程:在初期,菊 花的组织培养需光照,月季的花药培养不需光照;而在后期均需光照。
1. 植物的花药培养在育种上有特殊的意义。植物组织培养可用于无病毒植株及细 胞产物
的工厂化生产等方面。请回答相关问题:
(1) 利用月季的花药离体培养产生单倍体时, 选材非常重要。 一般来说, 在 ____________
期花药培养的成功率最高。 为了选择该期的花药, 通常选择 ____________ 的花蕾。 确定
1
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花粉发育时期最常用的方法有 ____________法,但是对于花粉细胞核不易着色的植物,
需采用 ____________ 法,该法能将花粉细胞核染成 ____________ 色。
(2) 若要进行兰花无病毒植株的培育,首先选择兰花的 ____________作为外植体。从外
植体到无病毒植株试管苗,要人为控制细胞的 ____________和 ____________过程。
(3) 进行组织培养需配制 MS 培养基,在该培养基中常需要添加 ____________ 、
____________ 等 植 物 激 素 。 欲 有 利 于 根 的 分 化 , 植 物 激 素 的 用 量 比 例 应 为
________________________________________________________________________ 。
(4) 不同植物的组织培养除需营养和激素外, _________________ ___________等外界条
件也很重要。
无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素,下列各项中使用化学药剂进行消毒
的是 ____________ ,采用灼烧方法进行灭菌的是
____________。 ( 填序号 )
①培养皿
②培养基
③实验操作的双手
④三角锥形瓶⑤接种环
⑥花蕾
答案
(1)
单核靠边
完全未开放
醋酸洋红
焙花青—铬矾
蓝黑 (2)
茎尖分生组
织
脱分化 ( 或去分化 ) 再分化 (3)
生长素
细胞分裂素 ( 两空顺序可以颠倒
) 生长素
多于细胞分裂素
(4)pH 、温度和光照
(5) ③⑥ ⑤
解析
(1)
早期的花药比后期的更容易培养成功。一般来说,在单核期,细胞核由中央
移向细胞一侧的时期,
花药培养成功率最高。
该时期的花药通常存在于完全未开放的花
蕾中。 (2)
根尖、茎尖约 0~ 0.1 mm 区域中几乎不含病毒。病毒通过维管系统移动,而
分生组织中不存在维管系统,
且茎尖分生组织中, 代谢活力高, 竞争中病毒复制处于劣
势。 (3) 生长素与细胞分裂素等植物激素可调节脱分化和再分化。当生长素含量多于细
胞分裂素含量时,利于生根。
(4) 植物培养时,除需要营养、激素外,还需要适宜的温
度、 pH和光照等。 (5) 对实验器具进行灭菌处理,对实验过程中的具有生物活性的材料或用具进行消毒处理。
1. 植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同
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