菌种管理规程.docx

文件名称 菌种管理规程 文件编号 QB-WI/10-004-00 版本号 00 页码 制定人 制定日期 审核人 审核日期 批准人 批准日期 生效日期 管理部门 质量部 分发部门 总经理口 技术部口 质量部口 生产部口 管理者代表口 商务部口 销售部口 行政部口 仓库口 序号 修订原因及目的 修订内容 01 文件新建 / 文件名称 菌种管理规程 文件编号 QB-WI/10-004-00 版本号 00 页码 目的 规范微生物学检定用菌种的管理， 最大限度降低变异率， 确保菌种的溯源性与稳定性， 从而确保微 生物学检验结果的准确可靠。 适用范围 适用于微生物实验用菌种管理，包括菌种的申购、传代、使用及销毁等。 引用/参考文件 ChP2015 实用药品微生物检验检测技术指南 职责 质量控制实验室负责菌种的申购、传代、使用、销毁等工作， QA负责监控和参与 00S调查。 程序 5.1术语和定义 5.1.1标准菌株 由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心或者其他经认可的机构提供的冷冻干燥 菌。 5.1.2传代菌株 用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种， 3代后的 传代菌株在需要时可以作为工作菌株使用。 工作菌株 用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。 5.1.4菌种的代 将菌种接种至一新鲜培养基上或培养基内， 每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干 燥菌种为第0代。 5.2菌种来源 5.2.1标准菌株由中国药品生物制品检定所医学菌种保藏中心 (CMCC或者其他经认可的机构提供的冷 冻干燥菌种。 5.2.2质量控制实验室涉及到的菌种种类、代码、保存方法及保存条件如下。 菌种名称 菌种代码 保存方法 保存温度 保存期限 金黄色葡萄球菌 CMCC(B)26003 TSA斜面 2?8 C 1个月 冷冻干燥管 -20 C 1年 铜绿假单胞菌 CMCC(B)10104 TSA斜面 2?8 C 1个月 冷冻干燥管 -20 C 1年 枯草芽孢杆菌 CMCC(B)63501 TSA斜面 2?8 C 1个月 冷冻干燥管 -20 C 1年 白色念珠菌 CMCC(F)98001 SDA斜面 2?8 C 3个月 冷冻干燥管 -20 C 1年 黑曲霉菌 CMCC(F)98003 SDA斜面 2?8 C 3个月 冷冻干燥管 -20 C 1年 生孢梭菌 CMCC(B)64941 TSA斜面 2?8 C 1个月 冷冻干燥管 -20 C 1年 5.3菌种的申购、验收、保存 5.3.1菌种的申购 微生物室QC依据菌种的库存及菌种的使用情况，提出采购申请，申请需明确菌种的名称，标 准编号以及申购数量等信息。 质量部经理对申购计划进行审批， 审批后由公司的商务部按要求进行采购， 采购过程执行 《采 购控制程序》。 菌种的采购需向法定的业务部门或者认可的机构采购。 购买菌种的同时应保留相关证明资料，说明菌种的名称、代数、数量等。 5.3.2菌种的验收 微生物室QC负责对采购回的菌种以及相关的证明资料进行验收； 验收应包括菌种外包装的完好性、具体验收的依据为批准后的申购计划。 验收符合后签字确认并领回菌种，及时填写《菌种验收、入库记录》 ，并将菌种的相关证明资 料贴在菌种接收登记表当页背面留存。如验收不符合则拒绝签字领用，商务部负责退货处理。 5.3.3菌种的保存 5.3.3.1验收合格的冷冻干燥菌种，应保存在温度设定为 -20 C冰箱中保存，有效期可至 1年。 验收后的菌种需在验收合格接收后 14天内完成转种。 5.4菌种的传代 541菌种的传代次数不得超过 5代,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为第 0代（GO）,冷冻干燥 的原始菌种开启后转种，为第 1代（G1）； 5.4.2标准菌种的复苏、确认及传代 标准菌种的复苏 将一次性吸管数支、 培养皿、镊子、冻干菌种管、装有 TSB试管或SDB式管等移入生物安全 柜中，开启生物安全柜的紫外灯灭菌 30min后关闭紫外灯，备用。 将冻干菌种管外壁用 75%勺乙醇棉球擦拭一遍，放入培养皿中，待干。点燃酒精灯，将标准 菌种管封口的一端过火后开启， 用一次性吸管吸取少量相应液体培养基或者稀释液， 加入冻干管内将菌 种溶解。黑曲霉的菌种因为是孢子悬液管不需要加入液体培养基，直接拧开即可。 将菌种加入到相应的液体培养基中，根据菌种类型的不同将其置于不同温度下培养不同时 间。原冻干菌种管、使用过的一次性吸管待 121 C, 30min高温湿热灭活后处理。不同菌种稀释液与培 养条件见下表。 菌种名称 菌种代码 稀释液 培养温度 培养时间 金黄色葡萄球菌 CMCC(B)26003 TSB 30-35 C 72h 铜绿假单胞菌 CMCC(B)10104 T