核桃黑斑病病菌胞外多糖致病性及防控研究.pdfVIP

核桃黑斑病病菌胞外多糖致病性及防控研究 摘 要 本文以核桃黑斑病的病原菌黄单胞杆菌为供试菌株，研究了营养物质及培养条件 对该菌株生产胞外多糖产量的影响。测定胞外多糖的化学成分和致病作用，探究其对 核桃生理代谢的影响规律。同时，选用13种常用杀菌剂对核桃黑斑病进行室内毒力 测定及室外盆栽防治试验。主要研究结果如下： 1、发酵条件优化结果 通过单因素试验筛选出最佳发酵培养基和发酵条件：蔗糖5%、硫酸铵0.2%、谷 氨酸0.025%、碳酸钙0.3%、硫酸镁0.1%、硫酸亚铁0.05%、磷酸氢二钾0.3%、接 种量5%、装液量50mL/250mL、pH7、温度30℃。优化后胞外多糖产量为17.325g/L， 较优化前产量提升了22.58%。 2、胞外多糖的化学组成及致病性 结果表明，粗多糖的总糖含量、蛋白质含量、总糖醛酸含量、还原糖含量和溶解 度分别为78%、0.32%、9.42%、11.6%和0.451g/100mLH O 。将不同浓度的胞外粗多 2 2 糖作用于离体的核桃叶片，并进行培养观察。结果显示：胞外粗多糖具有致病性，能 够诱导健康植株发病，并且发病的程度同胞外粗多糖的浓度呈正相关。 3、生理代谢影响规律 胞外多糖溶液能使核桃呈现典型的黑斑症状，显著增加细胞膜通透性和丙二醛含 量。在一定浓度范围内，核桃胞外多糖与游离脯氨酸含量和防御酶活性呈正相关；而 当浓度较高时，胞外多糖与游离脯氨酸含量以及防御酶活性呈负相关，这说明高浓度 含量的胞外多糖溶液能使核桃机体组织遭到破坏，从而证明了胞外多糖在黄单胞杆菌 对核桃致病过程中具有重要作用。 4、室内药剂筛选 经过室内药剂化学防治结果表明，在设计不同浓度药剂处理中，其中在一定程度 上能够对核桃黑斑病病菌产生抑制作用的杀菌剂共有5种。该病原菌受到该5种药剂 的抑制影响各有强弱，其中对核桃黑斑病病原菌的抑制效果最佳的是浓度为0.3%的 四霉素，EC 为12.764ug/mL。链霉素、80%乙蒜素、12%中生菌素的抑制作用相对 50 较强，EC 分别为35.318ug/mL、296.483ug/mL、350.752ug/mL。2%春雷霉素的抑制 50 效果最差，EC 值为1399.59ug/mL。 50 I 5、室外盆栽防治试验 连续喷药3 次，每次间隔7d，浓度为0.3%的四霉素500倍液药剂对核桃黑斑病 病原菌的防治效果最佳，平均防效为74.6%，链霉素对核桃黑斑病病原菌防治效果次 之，平均防效为71.69%，两者差异不明显。2%春雷霉素防治效果最差，平均防治效 果为39.38%。结果表明0.4%四霉素是防治核桃黑斑病的高效杀菌剂，链霉素可以作 为备选杀菌剂。 关键字：核桃，黄单胞杆菌，胞外多糖，生理生化，药剂筛选 II Pathogenicity andControl ofExtracellularPolysaccharidefrom WalnutBlack SpotDisease Abstract In this paper, the pathogenic strain ofXanthomonas campestris pv.Juglandis(Pierce Dowson) was used as the tested strain, and the effects of nutrients and culture conditions on theproduction of extracellular polysaccharideswere studied.The chemical constituents and pathogenic effects of extracellular polysaccharides were determined to investigate the effects of their effects