促肾上腺皮质激素释放激素调控达氏鲟摄食的初探.pdfVIP

摘 要 为探究促肾上腺皮质激素释放激素 （CRF ）对达氏鲟摄食调节，本试验首次克隆 达氏鲟CRF 系统基因 （CRF、UI 、UCN2 、UCN3 、CRF-R1 、CRF-R2 和CRF-BP ） 的cDNA ，检测其在13 个组织中的分布，通过摄食前后及禁食复投喂探讨CRF 系统 基因表达响应，进一步通过CRF 的短期和长期腹腔注射研究CRF 短期和长期摄食调 控作用和潜在机制。结果如下： 首次获得达氏鲟CRF，成熟肽包含41 个氨基酸。CRF 表达量较高的组织分别是 脑、食道、胃、十二指肠和幽门盲囊。CRF 系统其它基因（UCNs ，CRF-Rs 和CRF-BP ） 也成功获得。组织表达显示脑和胃中的UCNs ，CRF-Rs 和CRF-BP 表达水平高。 摄食前后试验显示摄食后CRF 和UCNs 表达上调，禁食 10 天CRF 和UCNs 表 达下调，复投喂后表达上升 （P ＜ 0.05 ），暗示CRF 和UCNs 作为短期和长期饱腹 因子调节达氏鲟摄食调控；CRF-Rs mRNA 在摄食后 3h 有上升趋势，禁食 10 天中 CRF-Rs 可下调（P ＜ 0.05 ），暗示CRF-Rs 参与达氏鲟摄食调控过程并传导饱腹感； CRF-BP mRNA 在摄食前后和禁食复投喂试验中无显著差异，在摄食调控中可能没有 作为主要参与因子。 短期腹腔注射达氏鲟CRF （50、100 和200ng/g BW ）均显著降低0-1h 的摄食量， 100 ng/g BW CRF 极显著降低了达氏鲟摄食量 （P ＜ 0.01）。7 天长期腹腔注射CRF 显示50 和100ng/g BW 剂量CRF 均能显著降低达氏鲟1-7 天的日摄食量和累计摄食 量（P ＜ 0.05 ），表明CRF 可显著的短期和长期抑制达氏鲟摄食。进一步探究了CRF 处理后摄食调控因子的表达变化，外周注射CRF 可使脑UI 和UCN2 mRNA 表达主 要为下降，UCN3 表达主要为上升 （P ＜ 0.05 ），暗示 CRF 可影响中枢系统UCNs 介导的信号通路，而对外周系统UCNs 表达影响较少；脑CRF-R1 和CRF-R2 短期表 达不变但是有下降趋势，长期表达下降 （P ＜ 0.05 ），CRF-Rs 的减少暗示了CRF 通 过和中枢系统CRF-Rs 结合发挥厌食欲的作用；CRF-BP 作为结合蛋白，在长期注射 的中枢系统中表达显著增加（P ＜ 0.05 ），暗示CRF 持续注射激活中枢系统CRF-BP 来阻止CRF 和CRF-Rs 的信号传导。除了CRF 系统之间的互作，CRF 和其它摄食调 控因子（NPY 、CART、CCK、Ghrelin 和Apelin ）也存在互作，显示CRF 处理可增 加中枢系统饱腹因子的表达量，减少饥饿因子的表达量，而且 CRF 注射后中枢系统 I 和外周组织中摄食调控因子的表达模式呈相反结果。 结论为CRF 系统在摄食调控中可作为饱腹因子调节摄食，其中CRF 作为短期或 长期饱腹因子抑制达氏鲟摄食。CRF 处理引起CRF 系统基因及其它摄食调控因子的 复杂的表达变化，表明CRF 激活CRF 系统通过中枢系统和外周系统来抑制达氏鲟的 摄食。 关键词：达氏鲟；摄食调节；CRF ；UCNs ；CRF-Rs ；CRF-BP ；腹腔注射 II Abstract In order to explore the feeding regulation effect of CRF on fish, this experiment firstly cloned CRF system related factors (CRF, UI, UCN2, UCN3, CRF-R1, CRF-R2 and CRF-BP) in Dabry’s sturgeon. The cDNA was tested for tissue distribution of CRF-related factors. Furthermore, the expression response of CRF system related