GA调控玉米籽粒发育CesA1和CesA7表达的转录因子鉴定.pdf

摘 要 玉米籽粒主要包括种皮、胚乳和胚三大部分，籽粒中的主要成分有蛋白质、脂肪、 水分、纤维素、矿物元素等物质，其中纤维素约占种子总重量的6%-8%，具有保护种子 不受外力机械损伤和防止病虫害入侵的作用，在玉米生长发育和储藏过程中起着重要的 保护作用。研究玉米籽粒发育对于玉米高产、稳产，保证国家的粮食安全具有重要意义。 gibberellin GA 目前，关于赤霉素 （ ， ）介导的信号传导途径的研究有很多，主要集中在 GA 调控种子的萌发、花的发育、植物组织的生长过程中起着重要的作用，但 如何调控 玉米籽粒发育的研究鲜见报道。 课题组用50mMGA 处理田间长势相似的玉米植株，收种后进行考种以及测定籽粒 3 GA 中纤维素的含量，结果进一步证明了 在田间实际生产中的对籽粒发育的促进作用。 GA Mo17 10DAP RNA-Seq 用 处理玉米自交系 授粉后 的籽粒，利用 高通量测序技术进 行转录组测序。对转录组测序数据进行分析，筛选得到21个转录因子家族，52个转录 因子，通过生物信息学对显著性差异表达的基因做预测，初步选了6个转录因子作为候 bZIP53 ZmMADS18 NAC38 选基因，通过一些基础的实验筛选最终确定 、 、 这三个转录 因子作为本实验转录因子。通过现有在拟南芥以及水稻中已报道籽粒发育相关基因在玉 米中进行同源比对，在测序数据中进行分析，初步筛得受GA调控的玉米籽粒发育中的 相关基因，通过表达量等方面的综合考虑得到13个重要的功能基因。在筛选得到的13 GA 4 GA 个功能基因里发现， 对纤维素合成酶相关的基因影响有 个，推测 可能通过促 9 进玉米籽粒纤维素合成酶基因的表达来调控籽粒的发育。玉米中含有 个纤维素合成酶， 克隆这9个纤维素合成酶，通过一些实验筛选最终确定克隆CesA1和CesA7的启动子为 研究对象。本实验主要对GA 可能调控籽粒发育过程中转录因子bZIP53、ZmMADS18 NAC38 CesA1 CesA7 和 对 和 的启动子表达的进行重点研究，测定其基因的表达模式、 自身特性以及与纤维素合成酶启动子之间的影响。具体研究结果如下： 1.GA 处理后，籽粒容重、粒长和纤维素含量有提高，籽粒外层组织纤维素含量较其 他组织明显上升，并且胚乳结构发生明显改变。 2.bZIP53 ZmMADS18 NAC38 GA 、 、 基因均在玉米籽粒中表达。在 处理且授粉后的 bZIP53 7DAP ZmMADS18 7DAP NAC38 籽粒中分别测到 在 表达量最高， 在 表达量最高， i 在 10DAP 表达量最高。同时我们定位到bZIP53 定位于玉米叶片原生质体细胞核中， ZmMADS18和NAC38均定位于玉米叶片原生质体细胞核和细胞膜中。 3. bZIP53 CesA1 CesA