‘东红’猕猴桃果实发育过程主要营养物质变化及其代谢机理初探.pdfVIP

摘要 猕猴桃果实富含 Vc 、酚类物质、氨基酸、矿物质成分和膳食纤维等，营养价值 极高。近年来，红肉猕猴桃由于其独特的风味和营养价值越来越受到消费者的喜爱， 但对其营养物质的全面评价及其代谢机理的研究还不深入。本试验以红肉猕猴桃品种 ‘东红’为材料，采用高效液相色谱法（HPLC ）分析果实发育过程中糖、淀粉、有 机酸、酚类物质和花色苷含量的变化；并通过转录组测序 （RNA-Seq ）和荧光定量 PCR （qRT-PCR ）技术，筛选出糖、淀粉、有机酸、酚类物质和花色苷代谢相关的关 键基因，为猕猴桃果实营养物质的评价及其代谢机理研究奠定了基础。主要结果如下： （1）‘东红’果实中的主要酚类物质是表儿茶素（黄烷醇类化合物）和绿原酸（酚 酸类化合物），含量分别为15.33 mg ·g-1FW 、7.01 mg ·g-1FW ；槲皮苷（黄酮醇类化合 物）和原儿茶酸 （酚酸类化合物）含量次之，酚酸类化合物咖啡酸、对香豆酸和阿魏 酸含量较少。除了表儿茶素含量在果实发育过程中先升后降、绿原酸含量在发育后期 上升，其他酚类物质均在子房期含量最高，并随着果实发育而下降。转录组数据分析 发现，AcC4H 、AcHCT 、AcC3 ’H 、AcCCOAOMT 、AcFLS 、AcANR 调控主要酚类物质 的合成。 （2 ）‘东红’果实中的花色苷主要是矢车菊素3-O- [2-O- （β-木糖基）-β-半乳糖 苷] （Cy-xyl.gal. ）和矢车菊素 3-O-β-半乳糖苷（Cy-gal. ），均在子房期含量最高，子 房呈现出红色；花后 0-60 天，花色苷含量急剧减少，果实红色消失；随着果实发育 和成熟（花后90-150 天），花色苷含量显著上升，果实又呈现出红色。差异表达基因 分析与qRT-PCR 分析表明，AcLDOX2 表达与花色苷含量呈正相关，是调控花色苷合 成的关键基因；花色苷糖基化基因Ac5GGT 和酰基化基因Ac5AT 在果实发育后期对 花色苷修饰与稳定起着重要作用；转录因子AcMYB4-1 对花色苷合成起负调节作用， 而AcMYB 10 在果实发育后期调控花色苷的合成。AcbHLH137 和AcbHLH74-2 对花色 苷生物合成和积累起正调控作用。 （3 ）‘东红’果实中的可溶性糖含量在花后 0-60 天和花后 90-150 天快速增加， 在花后 60-90 天含量变化不明显；淀粉含量随着果实的发育持续积累。‘东红’果实 中糖含量果糖＞葡萄糖＞蔗糖。果糖和蔗糖含量随果实发育持续增加，在果实成熟时 I 含量分别增加4.21 倍、10.04 倍。葡萄糖含量总体呈上升趋势，在花后0-60 天有所下 降。蔗糖合成方向的基因AcSPS2 、AcSPS3 、AcSPP 、AcSuSy1 、AcSuSy3 和AcSuSy4 表达水平在果实生长发育过程上调，是合成蔗糖的关键基因；AcINV2 表达水平在花 后60 天达到最大随后下降，积累果糖和葡萄糖；淀粉合成相关基因AcSBE1 和AcGPT 的高水平表达是淀粉持续积累的原因。 （4 ）‘东红’果实中的有机酸主要是柠檬酸和苹果酸，酒石酸次之。柠檬酸含量 在花后60 天前维持在很低水平，花后90 天显著上升至13.71 mg ·g- 1FW ，并保持到果 实成熟。苹果酸含量在花后0-60 天和花后90-150 天显著增加，随着果实发育快速降 低。酒石酸含量在花后30 天上升，之后快速下降。其他有机酸含量总体随着果实的 发育成熟而下降。苹果酸脱氢酶基因AcMDH1 和AcMDH2 表达水平在花后0-60 天和 花后 90-150 天显著下调，在花后 60-90 天上调，与苹果酸含量负相关，说明它们负 向调控苹果酸的合成；而柠檬酸合成基因AcCS1 表达水平显著上调，使得柠檬酸含 量增加。 关键词：猕猴桃；果实发育；营养物质；转录组测序；基因表达 II Abstract Kiwifruit has extremely high nutriti