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* 实验 血清葡萄糖测定 葡萄糖氧化酶法 * 【实验要求】 1.掌握掌握血糖测定葡萄糖氧化酶法(GOD-POD法)的原理,操作方法 2.熟悉葡萄糖测定的临床意义; 3.巩固分光光度计的使用。 * 【实验原理】 葡萄糖氧化酶(GOD)催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢。在过氧化氢酶(POD)及色原性受体4-氨基安替比林(4-AAP)的存在下,过氧化氢释放氧使色素原氧化生成红色醌类化合物。醌的生成量与葡萄糖成正比,在波长520nm处比色,求得葡萄糖含量。 * 【操作步骤】 加入物 / ml 测定管(U) 标准管 (S) 空白管 (B) 待测血清 0.02 - - 葡萄糖标准液 - 0.02 - 蒸馏水 - - 0.02 GOD-POD试剂 2.0 2.0 2.0 立即充分混匀,37C°水浴10分钟,用520nm波长比色,0.5CM 比色杯,以空白管调零,读取各管吸光度。 * 【计算】 血清葡萄糖(mmol/L)= Au:测定管吸光度 As:标准管吸光度 Cs:标准管浓度 * 【参考范围】 血清葡萄糖:3.89~6.11 mmol/L * 【临床意义】 1.生理性高血糖 见于饭后1~2h,注射葡萄糖或摄入高糖食物后、情绪紧张肾上腺素分泌增加时,但不应超过10mmol/L。 2.病理性高血糖 见于(1)内分泌腺功能障碍能引起高血糖,如胰腺β细胞损害导致胰岛素分泌缺乏,血糖可超过正常,临床上称为糖尿病。其他内分泌疾病引起的各种对抗胰岛素的激素分泌增加也会出现高血糖;(2)颅内压增高:颅内压增高刺激血糖中枢,如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等;(3)由于脱水引起的高血糖:如呕吐、腹泻和高热等可使血糖轻度增高。 * 【临床意义】 3.生理性或暂时性低血糖 见于饥饿、剧烈运动、注射胰岛素后、妊娠和服用降糖药后。 4.病理性低血糖 见于(1)胰岛β细胞增生瘤等,使胰岛素分泌过多;(2)对抗胰岛素的激素分泌不足,如垂体前叶功能减退,肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长素、肾上腺皮质激素分泌减小;(3)严重肝病患者,由于肝脏储存糖原及糖异生等功能低下,肝脏不能有效地调节血糖。 * 【注意事项】 1、注意准确的加入所需要的液体量。 2、注意胆红素、谷胱甘肽、尿酸和维生素C等一些还原性物质将使结果受到干扰。 * 【打扫卫生】 1、实验结束后对自己用过的试管、移液管等物品进行清洗。 2、打扫桌面与地面卫生。 3、带齐本人物品,离开实验室。 * 谢 谢!
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