生物化学：第16章 转录.pptVIP

1. mRNA来自hnRNA 核酸序列分析证明： mRNA是去掉大部分中间片段的hnRNA。 核酸杂交实验证明： ①hnRNA与DNA模板链可以完全配对； ②而mRNA与DNA模板链杂交则出现部分配对的局部双链区域和中间相当多的套索状的单链区段。 因此提出真核生物断裂基因的概念。 真核生物结构基因，由若干个编码序列和非编码序列互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 断裂基因(splite gene) 非编码区 A~G 编码区1~7 2. 外显子(exon)和内含子(intron) 外显子——在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列（初级转录产物上有，成熟转录产物上也有的序列） 内含子——隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列（初级转录产物上有，成熟转录产物上没有的序列） 外显子 内含子 DNA mRNA 转录 形成套索RNA，外显子靠近 并接体 去除套索RNA，连接外显子 成熟mRNA 3. mRNA的剪接 snRNP与hnRNA结合成为剪接体（剪接场所） 目 录 套索剪切模式 内含子剪接接口： 5′ GU┄┄AG-OH- 3′ snRNA与核内蛋白质组装形成小核蛋白体（snRNP） 剪接过程的二次转酯反应 ? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 4. mRNA的编辑（mRNA editing） 人类apo B基因 mRNA（14500个核苷酸） 肝 apo B100 （分子量为500 000） 肠道细胞 apo B48 （分子量为240 000） mRNA编辑 第2153位C→U, CAA→UAA m7 m7 m7 m7 鸡卵清蛋 白基因 hnRNA 加尾 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA tRNA前体的转录合成 二、tRNA的转录后加工 tRNA前体的切断和剪接加工 tRNA3-末端-CCA序列的添加 tRNA的碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 三、rRNA前体的转录和剪接加工 rRNA前体的转录和剪接加工 原核生物转录过程中的羽毛状现象 转录延长动画 原核RNA转录合成的终止机制有两种： 　1．依赖?因子的转录终止 　2．非依赖?因子的转录终止： （三）原核转录终止 ● ?因子是个同六聚体； ● ?因子能结合RNA，与poly C的结合力最强； ● ?因子有ATP酶和解螺旋酶的活性。 依赖ρ因子的转录终止 RNA转录产物形成寡聚U及发夹形的二级结构，引起RNA聚合酶变构及移动停止，导致RNA转录的终止。 2．非依赖Rho的转录终止： 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` RNA 5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT... 3? DNA UUUUU...… UUUU...… 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 茎环(stem-loop)/发夹(hairpin)结构 茎环结构使转录终止的机理 发夹使RNA聚合酶变构，转录停顿； A-U配对最不稳定，使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。 非依赖ρ的转录终止 ρ ′ pppG 5 pppG 5 ′ 第三节 真核生物的转录过程 The Process of Transcription in Eukaryote 生化教研室 雷 康 福 610939 种类 I II III 转录产物 45S-rRNA hnRNA 5S-rRNA tRNA, snRNA 对鹅膏蕈碱的反应 不敏感 极敏感 中度敏感 （mRNA前体） 一、真核生物的RNA聚合酶 羧基末端结构域 (carboxyl-terminal domain, CTD) RNA聚合酶Ⅱ最大亚基的羧基末端有一段共有序列为Tyr-Se