临床输血检验技术、教学服务模块 教学课件、课件、标准化理论课件、临床输血过程 不规则抗体筛查与鉴定.pptVIP

不规则抗体鉴定-微柱凝胶介质抗人球蛋白法 对不规则同种抗体筛选试验阳性的被检者应检查其抗体特异性。根据谱细胞（1-10号共10个鉴定细胞）与被检者血清在三种介质（盐水、酶、抗人球蛋白）中反应结果加以判定。 【实验原理】 不规则抗体鉴定-微柱凝胶介质抗人球蛋白法 谱细胞（Panel Cell） 由8～12个人份的已知血型表现型的O型RBC配套组成 具有各种不同的抗原成分，分布各具特点，与抗体反应出现不同的格局 能检出常见抗体和稀有抗体 每种抗原在谱细胞上保持一定的阴阳比率 为了证实单价抗体，使用的相应抗原RBC应为1个以上 不规则抗体鉴定-微柱凝胶介质抗人球蛋白法 不规则抗体鉴定-微柱凝胶介质抗人球蛋白法 1．自身对照试验应为阴性。若自身对照试验为阳性，则可能存在自身免疫抗体，如患者近期输过血，还应考虑同种抗体的存在； 2．按照抗体筛选观察到的反应结果或按患者表型选择谱红细胞； 3．临床上很难找到完全覆盖所有抗原的谱红细胞，因此，只用一套谱红细胞不能对所有的不规则抗体进行鉴定。应选择不同厂家来源的谱红细胞，来鉴定不同的特异性抗体； 4．临床上常见抗体主要是针对ABO、Rh、MNS、Kell、Kidd、Duffy等血型系统主要抗原的抗体。其中主要是Rh系统的同种抗体，出现的频率由高到低为：抗-E＞抗-D＞抗-c＞抗-C＞抗-e，最多见的是抗-E。 【质量控制】 不规则抗体鉴定-微柱凝胶介质抗人球蛋白法 5、不规则抗体鉴定试验至少要包括： ①自身细胞检查 观察受血者血清与自身细胞的反应情况，确定血清中是否存在自身抗体、同种抗体或两种抗体同时存在； ②谱红细胞 谱红细胞是用于不规则抗体鉴定的标准红细胞，一般是由8～20单人份的己知血型表型的O型红细胞配套组成。谱红细胞的功能必须具备能够检测出常见抗体及某些罕见抗体，因此，不仅要求涵盖常见且具有临床意义的抗原，还要保证这些抗原在一组谱红细胞的分布特点，以便在检测相应抗体时会出现不同的反应格局。另外，为了能从统计学上保证对抗体特异性的确认，每一种血型抗原最好在谱红细胞上保持一定的阴性和阳性比例，使血清型检查的结果表现出客观规律性，而不是偶然的结果。 【质量控制】 不规则抗体鉴定-微柱凝胶介质抗人球蛋白法 不规则抗体鉴定试验检测出受血者血清中某种特异性抗体时，对临床交叉配血有很大的帮助。对于急诊需要输血的患者，选择不含与其特异性抗体相应的抗原且交叉配血相容的献血员红细胞，即可输血，从而避免输血反应的发生。 【临床应用】 小结 1.不规则抗体两类：IgG型、 IgM型 2.不规则抗体筛查方法：先盐水介质法，后聚凝胺介质法或抗人球蛋白法 3.盐水介质法只能检测IgM型不规则抗体； IgG型抗体需要选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白法 4.不规则抗体筛查试验结果阳性，应进一步作抗体特异性鉴定。当抗体强度弱，或血清中含有两种及以上抗体时，应结合吸收放散试验，对抗体的特异性进行分析 思考题 1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行？ 2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介质法一种方法进行不规则抗体的筛查？ * 职业教育医学检验技术专业教学资源库 受伤严重，需要立即输血！！！但交叉配血不相容？？？？ 1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价及临床意义 3.熟悉不规则抗体鉴定试验的原理、方法及结果判断。 学习目标 不规则抗体 概念：不符合ABO血型系Landsteiner 法则的血型抗体，即抗-A、抗-B 以外的血型抗体 Landsteiner法则 不规则抗体 产生：妊娠、输血或注射药物引起 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少 在盐水介质中能直接连接相应的红细胞，使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全抗体 IgM抗体 多以五聚体形式存在，分子最大 单体形式存在，分子量较小 盐水介质中只能致敏相应抗原的红细胞，而不能使之凝集，又称为不完全抗体 必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集 IgG 抗体 聚凝胺法 抗人球蛋白法 不规则抗体筛查方法 盐水介质法 聚凝胺介质法（最常用） 抗人球蛋白介质法（经典） 不规则抗体检测原理 不规则抗体检测原理 35.7nm 不规则抗体检测原理 14nm 1.红细胞上已有不完全抗体致敏 2.加入聚凝胺，缩短红细胞之间的距离，不完全抗体同时与两个红细胞结合使其特异性凝集 3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺 4.不完全抗体的结合，特异性凝集不消失 聚凝胺 枸橼酸钠 不完全抗体 聚凝胺介质法 2.不完全抗体结合在红细胞表面,但是不能和两个红细胞同时结合（致敏） 3.加入抗人球蛋白 1.红细胞彼此之间有一定的间距 4.抗人球蛋白同时和两个不完全抗体的Fc段结合，从而