伤寒沙门菌fljB∶∶lacZ变异株的制备.docxVIP

伤寒沙门菌fljB :: lacZ变异株的 制备 【摘要】目的：为研究伤寒沙门菌z66 鞭毛抗原编码基因fljB的表达调节机制， 建立该fljB 基因的3 -半乳糖昔酶基因插 入变异株。方法： 采用自杀质粒介导的同 源重组方法进行制备。设计加接 Kpnl和 Sal I的特异性引物，用 PCFT增获得fljB 基因的上、下游同源性 DNAt段，并与用 Kpn I和Sal I酶切pSV-半乳糖昔酶载体 的片段定向连接，将连接片段克隆至自杀质 粒pGMB151再通过电击法将重组质粒转入 伤寒沙门菌，在含X-Gal的蔗糖平板上筛选 获得同源重组的变异株。结果： 经筛选获 得阳性克隆，经PCF^序列分析证实，fljB 基因中的763 bp被3 550 bp 的lacZ片段 替代。结论： 成功构建伤寒沙门菌 flj :: lacZ突变株，为进一步研究fljB基 因表达调节机制奠定了基础。 【关键词】 伤寒沙门菌；fljB 基因；3 - 半乳糖昔酶基因； 基因融合 I Abstract ] Objective: To study the mechanisms of expressional regulation of fljB : z66, the fljB : lacZ mutant strain of Salmonella enterica serovar Typhi was constru