分析化学、教学服务模块 高效液相色谱仪的性能检查、课件 高效液相色谱仪的性能检查.pptxVIP

高效液相色谱仪的性能检查 永州职业技术学院 李玉婷 高效液相色谱仪的性能检查 2 一、实验目的 1. 了解高效液相色谱仪的基本结构及主要性能指标 2.熟悉高效液相色谱仪的一般使用方法。 高效液相色谱仪的性能检查 一、实验原理 1.流量精度： 是流量的重复性，以相对标准偏差（RSD）表示。 2.噪音： 是由各种未知的偶然因素所引起的基线波动，通常以毫伏为单位来度量。 3.漂移： 是指基线朝一定方向缓慢变化，通常以单位时间内基线变化的数值来表示。 2 高效液相色谱仪的性能检查 二、实验原理 4.敏感度： 是指组分产生的信号大小恰好为噪音信号的二倍时，每毫升流动相中所含组分的量，它是评价检测器性能的一个重要指标。 2 高效液相色谱仪的性能检查 二、实验原理 5.定性和定量重复性试验： 是指在同一实验条件下，组分的保留时间和峰高（或峰面积）的重现性。保留时间的重现性通常以被分离组分的保留时间之差（∆tR）的相对标准偏差来表示，而色谱峰高的重现性通常以被分离组分的峰高之比的相对标准偏差来表示。 2 高效液相色谱仪的性能检查 高效液相色谱仪的构造 2 高效液相色谱仪的性能检查 二、实验内容 2 高效液相色谱仪的性能检查 10 操作步骤 调节指示流量在1.0 ml/min处测定流量，用10 ml容量瓶在出口处接收流出液，准确记录流出10 ml所需的时间，换算成流速（ml/min），重复5次。照上方法依次在指示流量2.0 ml/min、3.0 ml/min处测定流量。 二、实验原理 第一步 流量精度检查 2 高效液相色谱仪的性能检查 色谱工作站 进样器 高压泵 流动相 色谱柱 检测器 数据处理 2 高效液相色谱仪的性能检查 第二步 基线稳定性（噪音和漂移） 检查 2. 操作步骤 待仪器稳定后，记录基线1h。 2 高效液相色谱仪的性能检查 1. 实验条件 色谱柱：YWG - C18 , 10µm；柱温：室温；流动相：甲醇 – 水（80:20）；流量：1 ml/min； 检测器：UV – 254nm ；衰减指数：K=1；纸速：1.0 cm/min； 在上述色谱条件下，待基线平稳后开始进样。以萘的甲醇溶液（1µg/ml）为样品，每次进样量1µl，重复进样5次。记录色谱图，量出峰高和峰面积。计算敏感度。 2. 操作步骤 第三步 灵敏度测定 2 高效液相色谱仪的性能检查 1. 实验条件 色谱柱：YWG - C18 , 10µm；柱温：室温；流动相：甲醇 – 水（80:20）；流量：1 ml/min； 检测器：UV – 254nm ；衰减指数：K=1；纸速：1.0 cm/min； 在上述色谱条件下，待基线平稳后,开始进样。以苯和萘的混合甲醇溶液作试样，每次进样适量（根据峰高调节检测器的灵敏度或进样量）重复5次进样。记录每次色谱图中各组分的保留时间，测量出各个组分的峰高。计算重复性。 2. 操作步骤 第四步 定性定量重复性测定 2 高效液相色谱仪的性能检查 THANK YOU