茄子抗青枯病鉴定技术规程.docVIP

DB43/T—2014 ICS DB43 湖南省地方标准 DB43/T—2020 茄子抗青枯病鉴定技术规程 Regulation for evaluation of eggplant resistance to Bacterial wilt （征求意见稿） 2020- - 发布 2020- - 实施 湖南省质量技术监督局???发布 DB43/T—2020 DB43/T—2020 PAGE 2 II II 目??次 TOC \o 1-1 \h \u 2677 前??言 3 11692 1 范围 4 24923 2 规范性引用文件 4 6506 3 术语和定义 4 11226 4 茄子青枯病菌接种体制备 5 15647 5.室内抗性鉴定 5 12804 6 病情调查 6 444 7 抗病性评价 7 15499 8 抗性鉴定记载表格 7 前??言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由湖南省农业农村厅提出。 本标准由湖南省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：湖南省蔬菜研究所 本标准主要起草人：杨建国、汪端华、吴双花、李倩 PAGE PAGE 4 PAGE 3 PAGE 3 茄子抗青枯病鉴定技术规程 1 范围 本规程规定了茄子青枯病鉴定的定义和术语、接种体制备、室内抗性鉴定、病情调查、抗病性评价以及鉴定记载表格。 本规程适用于湖南地区各类茄子材料、品系及品种青枯病抗性鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 1858.4-2010 番茄抗青枯病鉴定技术规程 NY/T 2060.2-2011 辣椒抗青枯病鉴定技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 茄子青枯病 Bacterial wilt 由细菌青枯假单胞菌（Ralstonia solanacearum）侵染引起土传病害，发病初期茄子个别枝条的一片或几片叶片局部萎垂, 后症状逐渐扩展到整株枝条上, 发病轻的植株白天萎蔫, 日落或早晨恢复正常。发病叶片初呈淡绿色, 后变褐焦枯, 病叶脱落或残留在枝条上;发病枝条髓部大多腐烂空心，维管束呈黄色或褐色，髓部和皮层组织也变色，用手挤压病茎的横切面有乳白色粘液渗出，病果表面正常，内部变褐色，后期病果呈水渍状，易脱落。 3.2 病原分离物 Pathogenic isolate 采用人工方法从植株发病部位分离获得病原物的纯培养物。 3.3 致病性 Pathogenicity 植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状。 3.4 人工接种 artificial inoculation 在适宜条件下，通过人工操作将接种体置于植物体的适当部位并使之发病的过程 4 茄子青枯病菌接种体制备 4.1病原物的分离与鉴定 采集自然发病的田间植株，在超净工作台中，将发病茎段在75%酒精中浸泡90s，灭菌水清洗2-3次，再放入2% NaClO中浸泡10-15min，灭菌水清洗2-3次，用报纸吸干茎段表面的水分，并将茎段切开，然后放入少量灭菌水中浸泡数十分钟，待看到明显的菌液渗出，吸取孢子悬浮液，采用镜检法用显微镜对孢子进行形态学鉴定。 4.2 接种体的繁殖 吸20-100μL的青枯病菌涂布或划线于TZC固体选择性培养基上，放入30℃恒温箱中倒置培养24小时。分离时挑起白色流动性强菌落，在未加琼胶的上述液体培养基上进行培养。 TZC（氯化三苯四氮唑）选择性培养基：现配现用，3g 蔗糖，5-10g 蛋白胨，3g 牛肉浸膏，琼脂粉7g，加蒸馏水定容至1000ml，调PH值至7.0，高温灭菌后加入0.05%的TZC。 4.3 接种体的制备 将增殖培养的病原菌液用无菌水稀释，用紫外分光光度计在波长 650nm 处测定病菌浓度，将菌液浓度调制成为 108cfu/mL悬浊液. 5 室内抗性鉴定 5.1 鉴定室 人工接种鉴定室应具备人工调节温度、湿度和光照的条件，使人工接种后具备良好的发病环境。 5.2 鉴定设计 鉴定材料顺序或者随机排列，每份材料重复3次，每一重复10株苗。 5.3 鉴定材料育苗 待鉴定的茄子种子先在2%的次氯酸钠溶液中浸种8-10min，用灭菌水冲洗干净后置于28℃的恒温培养箱中催芽，露白后播种于育苗钵内。育苗基质为草木灰（或草炭）、蛭石、菜地土以2:1:1的比例混合(或沙性土壤与草炭以3:2的比例混匀)，并经高温蒸汽灭菌（134℃，40min