省教育厅科学研究应用重点项目.docVIP

省教育厅编号项目类别 省教育厅编号 理工类 农林医类 通常 人文社科类 省教育厅科学研究项目 申 请 书 项 目　名　 称： SARS冠状病毒感染免疫学快速诊疗试剂盒研制 申 请 者： 所 在 单 位： 电 话： 传 真： 电子信箱 (Email): 申 请 日 期： 制 填 报 说 明 一、申请书各项内容，要实事求是，逐条认真填写。表示要明确、严谨。外来语要同时用原文和汉字表示。第一次出现缩写词，须注出全称。除署名外，项目申请书必需是打印件。 二、申请书一律用A4纸，于左侧装订成册。第二页起各栏空格不够时，请自行加页。 三、封面上“教育厅编号”由教育厅填写，“项目类别”在对应位置填写“关键”、“青年”、“通常”。 （封2） 简表 项目名称 SARS冠状病毒感染免疫学快速诊疗试剂盒研制 类别 基础研究 　 应用研究 通常 试验发展 研究年限 5月 至 年6月 申请经费 14万元 项 目 责任人 姓名 年纪 48 技术职务 教授 已获学位 硕士 所学专业 病原生物学 现从事专业 病原生物学 关键研究人员 姓 名 年纪 技术职务 已获学位 专业 署名 30 讲师 硕士 病原生物学 30 讲师 硕士 病原生物学 28 助教 硕士 临床检验 33 高级试验师 硕士 卫生检验 37 副教授 硕士 病原生物学 57 教授 本科 病原生物学 关键研究内容 本研究拟经过生物信息学软件分析并寻求中国分离SARS冠状病毒株S蛋白和M蛋白基因共同保守序列，RT-PCR扩增该基因，克隆至真核表示载体，在哺乳动物细胞中表示，用纯化蛋白抗原制备单克隆抗体来制备免疫金复合物，开发斑点免疫层析试纸条检测病毒对应抗原；同时将纯化抗原包被微孔板，用间接法酶联免疫吸附试验检测患者血清中对应抗体，二者互为结适用于SARS冠状病毒感染早期诊疗。本研究将为基层医疗机构诊疗SARS冠状病毒感染提供正确、特异、快速、方便、价廉诊疗试剂，为控制SARS冠状病毒在地级以下城市及广大农村传输和感染提供有力工具。 是否我厅在建关键学科，学科名称：否 1 二、立论依据 （包含项目标研究意义、中国外研究现实状况分析） 自 末在中国广东省发觉首例非经典肺炎病例以来，该疾病至今已经广泛扩散到香港、越南、东南亚及加拿大和美国等近30个国家和地域，至5月2日世界卫生组织（WHO）统计全球患者已多达6054 多例，且发病人数仍有不停增加趋势[1]。该病关键经过近距离空气飞沫和亲密接触传输，起病急、传输快，病死率高达10％，WHO将这种传染病称为重症急性呼吸综合征（Severe Acute Respiratory Syndrome，SARS）。中国香港和大陆、加拿大、美国等国家研究机构病原学调查研究表明引发该病病原体是冠状病毒家族一个新变种，命名为SARS冠状病毒[2，3，4，5]。 冠状病毒是引发人类上呼吸道感染病原，其感染在全世界各个地域广泛分布，关键发生在冬季和早春季节，通常引发成人一般感冒，也是成人慢性气管炎患者急性加重关键病原。冠状病毒分三个组群，组群1和2包含哺乳动物病毒，而组群3仅包含禽类病毒。人冠状病毒分别属于组群1和2，有OC43和229E两个抗原型，引发约30%中度上呼吸道感染疾病。SARS冠状病毒也是一个单正链RNA病毒，但研究结果表明该病毒是一个新病毒变种：SARS冠状病毒可在Vero细胞中生长；病毒编码制酶基因和S、E、M、N蛋白四基因聚类分析表明该病毒和已知三个组群有显著差异；用已知冠状病毒抗原检测不到患者恢复期血清中抗体[2]。 SARS冠状病毒感染含有很高传染性和较高死亡率，而且现在尚无特异性诊疗和预防手段，所以迫切需要早期诊疗以控制传染源和切断传输路径，降低对易感人群危害。对SARS冠状病毒早期诊疗关键包含细胞培养方法分离病毒、逆转录PCR扩增病毒RNA、血液中抗体检测等三种[6]。病毒细胞培养是诊疗该病金标准，但培养要求高，生长时间长，阳性率很低，不适于早期诊疗。逆转录PCR 含有高敏感性和特异性优点，能够在感染后1到2天检测体内病毒，即使能够辅助临床诊疗，不过病毒RNA提取困难、易降解，轻易出现假阴性结果；且操作易污染，轻易出现假阳性结果。抗体检测有间接免疫荧光和酶联免疫吸附试验（ELISA）两种，前者能够检测出病毒感染10天后产生 IgM型抗体,后者能够可靠地检出感染14-21天后SARS病人血清中病毒抗体（IgM/IgG），但这两种方法全部不能用于早期诊疗。细胞培养、RT-PCR和间接免疫荧光试验均需要特殊设备和条件，且操作人员需要专业培训并含