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民族药响铃草的体外抑菌活性研究 【摘要】 目的探讨响铃草的体外 抑菌作用。方法采用打孔琼脂扩散法和稀释 法对响铃草不同溶剂提取物进行抑菌实验 研究。结果响铃草的不同溶剂提取物对供试 细菌和真菌均有一定程度的抑制作用。 结论 响铃草提取物有明显的体外抑菌作用。 【关键词】 响铃草； 抑菌； 最小抑菌浓 度；抑菌圈 Abstract : ObjectiveTo study the antibacterial activities of different solvent extracts of Crotalaria ferruginea the agar diffusion and dilution method,minimal inhibitory concentration(MIC) and inhibitory circle of the extract were antibacterial activity of the extracts was different to different ferruginea Grah has good antibacterial activity in vitro. Key words : Crotalaria ferruginea Grah; Antibacterial; MIC circle ;Inhibitory响铃草为豆科狗屎豆属植物假地蓝 ;Inhibitory Crotalaria ferruginea Grah 的全草或带根 全草:1 ［。响铃草为多年生草本，花期 6? 10月，生于山坡、荒地］2］。在贵州、云南 较为常见，为贵州侗族常用药之一 ［3］。响 铃草味苦、微酸、性寒，在贵州民间用于久 咳痰血、耳鸣耳聋、头晕目眩、慢性肾炎、 扁桃体炎、淋巴腺炎、疔毒恶疮以及月经不 调等:4 ］。 目前文献中尚无响铃草的抑菌作用报 道，本实验首次对其不同溶剂提取物对常见 致病革兰氏阳性、革兰氏阴性菌以及黄霉菌 的抑制活性进行了研究，为阐明其抗菌特性 以及响铃草的进一步开发利用和寻找新的 抗菌药物提供基础。 1材料与方法1材料与仪器材料响铃 草购于贵州省药材公司，产地：四川，包装 批号060702。试剂石油醍，醋酸乙酯，甲 醇，乙醇，95气醇，二甲基甲酰胺均为分 析纯，购于贵阳中兴化学试剂公司。 菌种 购自中国微生物菌种保藏中心， 金黄色葡萄 球菌 Staphylococcus aureus ;大肠杆菌 Escherichia coli ;粪链球菌 Enterococcus faecalis ;黄霉菌 Aspergillus flavus ;绿 脓杆菌 Pseudomonasaeruginosa ;藤黄微球 菌 Micrococcus luteus 。培养基 MRSS!体 培养基：酪蛋白月东10 g,牛肉提取物10 g, 酵母提取物5 g，葡萄糖5 g，乙酸钠5 g , 柠檬酸二铉g ,Tween80 g,磷酸氢二钾g, MnSO4 H2O g, MgSO4 7H2O g, CaCO3 g, 琼脂15 g, 定容至1 000 ml, pH值 调至； 营养肉汤固体培养基： 蛋白月东10 g ,牛肉 膏3 g,氯化钠5 g,琼脂15 g,定容至1 000 ml, pH值 调至；查氏固体培养基：硝酸钠 3 g，磷酸氢二钾 g , MgSO4 7H2O g,蔗 糖30 g ,琼脂15 g ,液体培养基组成除了 不加琼脂外，与相应的固体培养基相同。 仪 器高低温恒温培养箱，旋转蒸发仪， SHZ-D(m )循环水式真空泵，电子天平净化 工作台，真空冷冻干燥机，超低温冰箱，双 光束紫外可见分光光度计。2方法响铃草 不同溶剂提取物的制备方法将干燥的响铃 草粉碎过40目筛，称取等量的响铃草3份， 每份150 g,分别置于1 000 ml的水、酒精、 醋酸乙酯中。每种溶剂浸泡 3次，每次置于 恒温摇床上振荡12 h,抽滤得到提取液。水 的提取液于-80C冷冻过夜后用真空冷冻干 燥机干燥；酒精提取液40 C减压旋转浓缩除 去酒精，于-80C冷冻过夜后用真空冷冻干 燥机干燥；醋酸乙酯提取液先减压浓缩除去 醋酸乙酯，得浸膏。 对响铃草不同溶剂提 取物的抑菌活性检测 菌种培养：金黄色葡萄球菌 staphylococcus aureus ,大肠杆菌 Escherichia coli ，绿脓杆菌 Pseudomonas aeruginosa，藤黄微球菌 Micrococcus luteus采用营养肉汤培养基活化培养， 粪链 球菌 Enterococcus faecalis 采用 MRS?养 基活化培养，黄霉菌 Aspergillus flavus 采用查氏培养基活化培养，分别将各菌种浓 度调至OD60倒为1