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实验一、槐米中芦丁的提取、分 离和鉴定 实验一 槐米中芦丁的提取、分离和鉴定 一、概述 槐米系豆科植物槐树（ Sophora japonica L. ）的花蕾（槐米）。具有清热、 凉血、止血的功效，用于治疗便血、痔血，尿血、血淋，崩漏，赤血痢下，风 热目赤，痛疽疮毒，还可用于预防中风。近年来被用作治疗高血压的辅助药物。 药理实验证明，槐花米具有调节毛细血管的渗透作用，抗炎作用，解痉、 抗渍疡作用，影响脂质代谢，抗菌等多种生物活性。槐花米中主要含有黄酮苷， 皂苷、甾醇和鞣质等成分，其中芦丁 (Rutin) 含量最高，达 12～20%。 主要化学成分的结构及理化性质： 芦丁（ rutin ）：C27H30O16 ·3H2O，浅黄色针状结晶， mp174～178℃（含三分子 水）；188℃（无水物）。难溶于冷水（ 1：8000～10000），可溶于热水（ 1：180～ 200），热甲醇（ 1：10），冷甲醇（ 1：100），热乙醇（ 1：60 ），冷乙醇（ 1：650）； 难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。 15 10 7 2 槲皮素（ quercetin ）：C H O ·2H O，黄色结晶， mp313～314℃（2 分子结 晶水），316℃（无水物）。能溶于冷乙醇（ 1：290 ），易溶于沸乙醇（ 1：23 ）， 可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶 剂。 二、实验部分 （一）实验目的 1、通过芦丁的制备，掌握黄酮类化合物提取分离的原理和操作。 2、掌握酸水解将芦丁生成槲皮素的方法。 3、掌握芦丁与槲皮素的鉴别方法，聚酰胺薄膜的操作方法，电子天平的使 用方法。 （二）实验原理 1、芦丁的提取原理： 芦丁中含有多个酚羟基，具有酸性， 故用碱提酸沉法。 2、芦丁的分离原理：芦丁在沸水中溶解，在冷水中析出。 3、芦丁的鉴定原理：芦丁与槲皮素分别为黄酮类化合物的苷与苷元，用 Molish 反应可以进行鉴别，也可以利用聚酰胺的氢键吸附性质进行定性分析， Rf 值也应不同。 （三）实验药材、仪器与试剂 1、药材：槐米 50g( 每组 ) 。 2、仪器：电炉子、不锈钢锅、量杯、 1000ml 烧杯、冰箱、滤纸、 PH试纸、 减压抽滤装置、锥形瓶、玻璃漏斗、纱布、电子天平、聚酰胺薄膜。 3、试剂：0.4%硼砂水溶液、石灰乳、 2%硫酸溶液、浓盐酸、蒸馏水、镁粉、 浓硫酸、甲醇、 90%乙醇、 1%三氯化铝醇溶液、醋酸镁乙醇液等。 （四）实验方法 1、芦丁的提取： （碱提酸沉法） 取槐米 50g，加 0.4%硼砂水溶液 400ml 至小锅中，加热煮沸，用石灰乳调 节 PH=9，加热微沸 30min ，随时补充失去的水分及控制 PH值，四层纱布过滤， 药渣再重复处理一次（不用调 PH值）。合并两次滤液，用浓盐酸调 PH=3，放入 冰箱中析晶。 2、芦丁的精制： （水重结晶法） （1）抽滤：用虹吸法先除去上清液，再进行抽滤，可更换滤纸。 （2 ）精制：取全部芦丁粗品， 加入蒸馏水 800ml，煮沸至全部溶解 （15min）， 趁热抽滤，放入冰箱析晶。 3、芦丁的水解： （酸水解法） 取芦丁 1g，加入 2%硫酸 150ml，小火加热微沸 30min，注意观察现象：溶 液由浑浊变澄清，逐渐析出黄色结晶，抽滤，得到槲皮素粗品。剩下的芦丁要 妥善保管，下次课还要带来。 4 、鉴别反应 （1）称槲皮素重量，计算水解率。 （2 ）薄层色谱鉴定 样品：自制芦丁及槲皮素的