免疫组织化学与组织学相关技术课件（研究生）细胞培养和组织工程.pptxVIP

细胞培养和组织工程 Cell Culture and Tissue Engineering;James P Alison;免疫疗法抗肿瘤的机制;PD1与PD-L1抑制剂抗肿瘤原理;第四章 细胞培养技术 Cell Culture Technique;PubMed上检索细胞培养的论文数;第四章 细胞培养技术;概述—细胞培养的应用广泛;概述—什么是细胞培养？ ;细胞培养(cell culture) ：离散细胞（包括单个细胞）在体外培养。 组织培养(tissue Culture)：组织块的培养(细胞不离散)或体外培养的细胞群聚集并重建三维组织结构的体外培养。 器官培养(organ Culture)：体内器官原基、整体或局部，保持原有组织学结构的体外培养。;概述—细胞培养的优点与缺点;概述—细胞培养的优点与缺点;概述—细胞培养的优点与缺点;三、细胞培养的基本技术;三、细胞培养的基本技术;三、细胞培养的基本技术; 组织块培养法;三、细胞培养的基本技术;恒河猴骨髓间充质干细胞原代培养;（三）传代培养;三、细胞培养的基本技术;三、细胞培养的基本技术;细胞的冻存： 保护剂：二甲基亚砜 (DMSO) ;2. 细胞的复苏：快速融化。 （1）将水浴锅预热至37℃。 （2）从液氮罐中取出冻存管。迅速将冻存管投入到已经预 热的水浴锅中解冻 （3）约1~2min后冻存管内液体完全溶解。取出冻存管， 以1000rpm离心3min。 （4）用酒精棉球擦拭冻存管的外壁，放入超净台内。 （5）吸弃上清液，向离心管内加入培养液，吹打制成细胞 悬液。细胞计数。接种密度以5×105/ml为宜。 （6）将细胞悬液分装入培养瓶内，放入37℃和5％CO2的 培养箱内培养。根据细胞生长状况及时换液传代。;三、细胞培养的基本技术;实验中的组织工程耳;一、组织工程的发展背景;1. The use of a combination of cells, engineering materials, and suitable biochemical factors to improve or replace biological functions. 2. An interdisciplinary field of research that applies both the principles of engineering and the processes and phenomena of the life sciences toward the development of biological substitutes that restore, maintain, or improve tissue function (Langer and Vacanti, 1993).;组织工程的基本概念 ;PubMed上检索再生医学、组织工程论文数;Regenerative medicine refers to both cell therapy and tissue engineering. Cell therapy utilizes new cells to replace damaged cells within a tissue to restore its integrity and function. Tissue engineering encompasses three approaches: the use of bioactive molecules such as growth factors that encourage tissue induction; the use of cells that respond to various signals; and the seeding of cells into three-dimensional matrices to create tissue-like constructs to replace the lost parts of tissues or organs (Howard et al., 2008).;二、组织工程基本方法;是将获得的种子细胞进行分离纯化、培养增殖，诱导分化，或经适当的基因修饰后，接种在可降解的三维支架材料上于体外联合培养，构建成具有三维有序结构、其各种特性与相应组织相容的活的组织块，然后植入体内，替代病损组织器官的部分或全部功能。组织工程研究目标是以最短的时间，使组织、器官的损伤得到最佳的修复，即完全再生性愈合。;三、组织工程三要素;组织工程三要素;1．种子细胞;来源