临床微生物学检验：支原体.pptVIP

鉴定 （1）油煎蛋菌落 （2）底物分解：葡萄糖（+） （3）TTC（氯化三苯四氮唑）还原： 无色变粉红色 （4）GIT，MIT 解脲脲原体（Ureaplasma urealyticum,Uu） 1954年从非淋菌性尿道炎（NGU）患者的尿道分泌物中分离出。 性接触和母婴传播为主。是非淋菌性尿道炎中仅次于衣原体（占50%）的重要病原体 。 按其分解尿素的特性命名。 是人类生殖泌尿道常见寄生菌之一，特定条件下致病。 临床意义 Uu多寄生在男性尿道、包皮和女性阴道。 1.最常见引起非淋菌性尿道炎 2. 上行引起男性前列腺炎或附睾丸。 3.女性阴道炎、宫颈炎并导致流产。 4.早产儿及低体重新生儿呼吸道和中枢神经系统感染。 临床意义 致病机制：侵袭性酶（磷脂酶、尿素酶、 IgA蛋白酶）及其毒性产物 5. 解脲脲原体感染与不育有关: 吸附精子表面，阻碍精子运动； 产生神经氨酸酶样物质，干扰卵子与精子结合； 解脲脲原体与精子有共同抗原，溶脲脲原体感染刺激机体产生的抗体对精子产生损伤。 生物学特性 1．形态结构：染色性与结构基本同肺炎支原体，形态以卵圆形多见，大小50-300nm。 解脲脲原体电镜扫描形态（×24000） 2．培养特性 （1）营养要求较高（培养基中含胆固醇酵母尿素等） 最适pH5.5—6.5，生长速度较Mp快。 （2）固体培养基 在5%CO2环境48h 形成15～50μm “颗粒”状或“油煎蛋”样小菌落（放大100倍才能见到） 3．生化反应 不分解葡萄糖和精氨酸，脲酶阳性（分解尿素） 4. 抗原结构 （1）脂多糖抗原 （2）蛋白质抗原 （3）脲酶抗原——种特异性抗原 有16个血清型，第4型频率最高。 5．抵抗力：基本同肺炎支原体。 生物学特性 解脲脲原体的小菌落（tiny strain，T株） 实验室检查 1．标本的采集 （1）非淋菌性尿道炎患者——尿道分泌物、中段尿 （2）慢性前列腺炎患者——前列腺液 （3）原因不明的不育症患者——精液 （4）阴道炎、宫颈炎患者——炎性分泌物、 羊水、血液 尿液标本→ 2000r/min离心10min → 取沉淀物200μl →接种 注意事项 （1）用拭子采集标本，取泌尿生殖道粘膜部位上皮细胞为好。 （2）病原体对热、干燥敏感，应立即送检，尽快接种。 （3）保存：室温保存不超过2h，2-8 ℃不超过12h。 实验室检查 实验室检查 2. 标本直接检查 核酸检测——PCR法 免疫斑点试验（IDT）：已知抗体检测Uu抗原。 3. 分离培养：液体固体二步培养法 接种于pH6.0含酚红和尿素的液体培养基35℃，观察颜色变化 ，澄清变红转种固体培养基 解脲脲原体在液体培养基中生长现象 阴性 阳性 （指示剂：酚红） 阳性 阴性 指示剂（酚红） 人型支原体（Mh） 主要寄居于生殖道，女性较常见。 形态结构与Uu相似。 分解精氨酸，不分解葡萄糖和尿素。对红霉素不敏感，而对四环素和林可霉素敏感。 培养最适pH在7.2－7.4,大于7.8易死亡。 微生物学检查与Uu相似。 人型支原体与解脲脲原体菌落 液体培养基 37℃， Uu培养24h，Mh培养48h 液体澄清透亮， 由黄变红 0.1ml转种于固体培养基 37℃，5%CO2， 2--3天 Uu、Mh分离培养及鉴定 液体—固体二步培养法 支原体培养+药敏试剂 支原体培养试剂 培养基 液体培养基成分：以牛心浸液为基础, 加入10%-20%的血清和新鲜酵母浸液。 特异性底物：尿素或精氨酸。 指示剂：酚红。 抑制物：青霉素等 将平板置于低倍镜下观察”油煎蛋“菌落（中央凹陷长入琼脂，密度较高；边缘密度低，扁平） 穿通支原体Mpe 穿透支原体为1990年从AIDS尿中发现的新型支原体。 为条件致病性支原体。 具有黏附与穿入细胞作用，引起细胞损伤死亡 为艾滋病的辅助致病因素，即AIDS的免疫缺陷增加了对穿透支原体易感性，而后者又能促进HIV复制，加速病情进展。 临床常见支原体生化与致病特征 支原体 葡萄糖 精氨酸 尿素 致病性 肺炎支原体 + - - 肺炎、支气管炎 溶脲脲原体 - - + 泌尿生殖道感染 人型支原体 - + - 泌尿生殖道感染 生殖器支原体 + - - 泌尿生殖道感染