临床血液学检验：第六章 红细胞检验的基本方法.pptVIP

成熟红细胞随机呈块状或束状聚集，主要表现1.多种抗体暴露；2.HA（自身免疫性）；3.非典型肺炎；4.金葡菌感染；5.冷凝集疾病。 第八节、免疫性溶血性贫血的检验 抗人球蛋白试验 冷凝集素试验 冷热溶血试验 三、冷热溶血试验 阵发性寒冷性血红蛋白尿征患者体内含有寒冷性溶血抗体(IgG)，在4℃条件下作用于自身红细胞后，即吸收补体造成溶血。将病人的血清置于冰箱中一些时间，再置于室温中，可出现溶血现象。这种先在低温时结合抗原并固定补体，在37℃时才表现溶血的抗体，又叫“双相抗体”（D-L抗体） 过筛试验 AIHA 检验 PNH检验 蛋白异常 检验 酶缺陷 检验 膜缺陷 检验 溶血 检验 叶酸 VB12 铁代谢 检验 贫血 第七节 阵发性睡眠性血红蛋白尿检验 酸化血清溶血试验 蔗糖溶血试验 蛇毒因子溶血试验 血细胞表型CD59/CD55的FCM分析 一、酸化血清溶血试验(Ham test) PNH患者RBC膜对血清中补体溶血作用异常敏感，在酸化的血清中(pH6.6～6.8) 补体溶血效应更为敏感，因此，产生酸溶血现象。 正常人红细胞与其自身血清及稀盐酸混合pH6.4～6.6，孵育60min，不发生溶血。 正常血清去补体后就不再溶解患者的红细胞，据此可作为诊断PNH 的依据。 HAM’S TEST 【Principle】 The complement present in serum is responsible for lysis of PNH cells with sensitivity to acidifiction. patient’s red cells suspension mixed with fresh complement ( same type control serum or patient’s own serum) acidified pH6.5 , 37℃1h lysis: no lysis: PNH normal or lack of PNH cells 临床意义 阳性见于PNH：强阳性为补体敏感型；弱阳性为补体不甚敏感型；阴性为补体不敏感型。 严重AIHA可阳性 HS可阳性 多次输血PNH应延长反应时间 注意事项： 正常对照血液应新鲜，陈旧血可致假阳性。 不能用抗凝血，因抗凝剂会阻止溶血。 有严重贫血而多次输血者，血中所含不正常红细胞相对减少，试验结果可显弱阳性或阴性。此时可相应延长温育时间（2h），再观察结果。 二、蔗糖溶血试验 PNH患者RBC膜对补体敏感，在低离子强度的蔗糖液中孵育后，促进了补体与膜的结合，致RBC膜形成小洞，而引起溶血。 SUGAR WATER TEST 【Method】 control serum ( or same blood type) Red cells suspension(patient) sucrose room temperature 1h no hemolysis exclude PNH PNH(lysis5%) hemolysis MA, IHA or some leukemia Red cells suspension + inactivated serum (56℃, 30’) pH6.5 , 37℃1h no lysis: Control tubes for excluding false negative 临床意义 阳性见于PNH 弱阳性见于MegA、AA、AIHA、HS 评价： 筛选PNH，阴性排除PNH，特异性差 阳性作Ham 第七节 阵发性睡眠性血红蛋白尿检验 酸化血清溶血试验 蔗糖溶血试验 蛇毒因子溶血试验 血细胞表型CD59/CD55的FCM分析 三、蛇毒因子溶血试验 原理：蛇毒因子C3b可通过旁路途径激活补体，PNH患者的补体系统激活后，对补体敏感的红细胞可发生溶解 第七节 阵发性睡眠性血红蛋白尿检验 酸化血清溶血试验 蔗糖溶血试验 蛇毒因子溶血试验 血细胞表型CD59/CD55的FCM分析 四、血细胞表型CD