临床血液学检验：红细胞膜缺陷检验.pptVIP

实验室检查 抗核小体抗体：阴性，抗SS-A抗体:阳性(+)，抗SS-B抗体:阴性，抗Sc1-70抗体:阴性，抗Sm抗体:阴性，抗着丝点B蛋白抗体:阴性，抗Jo-1抗体:阴性，抗nRNP/Sm抗体:阴性，抗核糖核蛋白抗体:阴性，抗组蛋白抗体:阴性，抗双链 DNA 抗体:阴性 ，抗核抗体定量:141.17U/mL。 白蛋白:33.7g/L，总胆红素:33.7umol/L，直接胆红素:6.5umol/L 直接Coombs试验:阳性(+)，酸溶血试验:阳性(+)，尿含铁血黄素试验:阴性，红细胞脆性实验：开始溶血:4.8g/L，完全溶血:3.2g/L，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性:4.96kU/L 诊断 1.孕2产1宫内妊娠23周+5 2.重度溶血性贫血? 3.系统性红斑狼疮 4.高龄孕妇 红细胞膜缺陷的检验 红细胞膜成分 　 人的红细胞胞膜由蛋白质、脂质、糖类及无机离子等组成。脂质占50%、蛋白质占40%、糖类占8%。磷脂分子比较特殊，它主要有一个圆球状的头部（亲水端）和两个细长的尾部（疏水端）。而细胞膜是由磷脂双分子层为基本支架，其间镶嵌着多种膜蛋白。 红细胞膜结构 红细胞膜的特点：1.膜的不对称性 2.膜的流动性 红细胞膜缺陷检验方法 红细胞膜蛋白电泳分析 红细胞渗透脆性试验 红细胞孵育渗透脆性试验 自身溶血试验及其纠正试验 酸化甘油溶血试验 高渗冷溶血试验 红细胞膜蛋白电泳分析 方法：红细胞膜蛋白的十二烷基硫酸钠聚丙酰胺凝胶电泳 原理：SDS与红细胞膜蛋白结合成SDS多肽复合物，并进行SDS电泳，根据各种膜蛋白相对分子质量的不同，得到电泳图谱，求出各膜蛋白组分百分率 应用评价：操作复杂，但可直接反应红细胞膜蛋白缺陷，有助于溶贫病因查找，是红细胞膜缺陷性疾病诊断的主要依据 红细胞渗透脆性试验 实验原理： 红细胞渗透脆性试验是检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液抵抗力的一个半定量试验。根据不同NaCl浓度的低渗盐溶液中红细胞溶血的情况间接反映红细胞表面积与容积的比值，反映对低渗盐溶液的抵抗性。比值愈小，红细胞抵抗力愈小，易于破裂，渗透脆性增高；反之抵抗力增大，不易破裂，渗透脆性减低。 红细胞渗透脆性试验结果示意图 红细胞渗透脆性试验结果示意图 红细胞渗透脆性试验 参考范围：简易半定量法 开始溶血：3.8~4.6g/L NaCl溶液。 完全溶血：2.8~3.2g/L NaCl溶液。 红细胞渗透脆性试验 临床意义： 1.增高 主要见遗传性球形红细胞增多症、遗传性椭圆形红细胞增多症和部分自身免疫性溶血性贫血、遗传性口型红细胞增多症 等。 2.减低 主要见于珠蛋白生成障碍性贫血、血红蛋白C、D、E病，低色素性贫血，阻塞性黄疸，脾切除术后（红细胞胞膜面积增大）、肝炎、肝硬化、肝癌等。某些中药（如当归）、磁场、紫外线亦可降低红细胞渗透脆性。 球形红细胞 椭圆形红细胞 红细胞渗透脆性试验 应用评价 1.本试验简便实用，但应严格控制影响试验因素；本试验敏感性较差，需结合其他试验项目检查结果进行综合分析。 2.本试验对溶血性贫血的病因诊断有参考价值，渗透脆性增高、减低和正常，分别提示溶血可能是由于红细胞的膜、血红蛋白和酶的异常所引起。 3.对红细胞变形性轻型病例的诊断，采用敏感性更高的红细胞渗透脆性孵育试验更有价值。 红细胞孵育渗透脆性试验 原理：将患者血液置于37℃孵育24小时，使红细胞代谢继续进行。由于能源葡萄糖的消耗，储备的ATP减少，红细胞膜对阳离子的主动传递受阻，造成钠离子在红细胞内聚集，细胞膨胀，孵育渗透脆性增加。有细胞膜缺陷及某些酶缺陷的红细胞内能源容易耗尽，使孵育脆性明显增加 临床意义：多用于轻型遗传性球形红细胞增多症、遗传性非球形红细胞溶血性贫血的诊断与鉴别诊断 自身溶血试验及其纠正试验 实验原理：红细胞在37℃孵育48小时，其间由于膜异常引起Na+内流倾向明显增加，钠泵作用增加，ATP消耗过多，或糖酵解途径酶缺乏所引起的ATP生成不足等原因，导致ATP储备量减少，钠泵功能减弱，Na+和水在细胞内蓄积，红细胞膨胀，破解溶血，称为自身溶血试验（autohemolysis test）。在孵育时，加入葡萄糖或ATP作为纠正物，观察溶血能否有一定的纠正，称为纠正试验（correcting test）。 自身溶血试验及其纠正试验 参考范围：红细胞在无菌条件下孵育48小时，不加纠正物的溶血率一般4.0%,加葡萄糖的溶血率0.6%，加ATP的溶血率0.8%. 自身溶血试验及其纠正试验 临床意义： 1.遗传性球形红细胞增多症自身溶血率增加，能被葡萄糖或ATP纠正。 2.G6PD缺乏症等戊糖旁路代谢缺陷的患者自身溶血率增加，能被葡萄糖纠正。 3.PK缺乏症时，不能利用葡萄糖产生ATP，其自身溶血率明