补阳还五汤类方成分的药代动力学比较研究.docxVIP

摘要：目的 比较补阳还五汤类方（补阳还五汤和脑健片）中阿魏酸、洋川芎内酯 a、藁本内 酯在大鼠体内的药代动力学特征。方法 将补阳还五汤类方灌胃颈静脉插管大鼠，采用 hplc-dad 法同时检测 3 种成分在不同时间点的血药浓度，经 das2.0 计算得单成分的药代动 力学参数，再采用总量统计矩（相似度）法整合成整体药代动力学参数并进行比较。结果 3 种成分在体内的总量统计参数相差甚远，而 3 种成分总和的统计矩参数却比较接近，补阳还 五汤和脑健片在大鼠体内 auc 分别为 240.6 和 133.0 ，mrt 分别为 3.192 min 和 3.259 min ， vrt 分别为 21.59 min2 和 19.75 min2 ；补阳还五汤和脑健片中 3 种成分总量的相似度达到 0.977 8 。结论 补阳还五汤和脑健片在体内代谢过程具有相似性，中药复方发挥功效依赖于 多成分的整体贡献。 关键词：药代动力学；补阳还五汤；脑健片；阿魏酸；洋川芎内酯 a;藁本内酯 doi ： 10.3969/j.issn.1005-5304.2016.07.021 中图分类号： r285.5 文献标识码： a 文章编号： 1005-5304 （ 2016） 07-0082-05 补阳还五汤类方包括补阳还五汤及其精简方（脑健片） 。补阳还五汤出自《医林改错 ?瘫 痿论》，由黄芪、 川芎、 当归等 7 味中药组成， 系清代医家王清任创立的治疗半身不遂辨证属 气虚血瘀证的经典名方。脑健片处方是遵循补阳还五汤之方义，秉承 益气祛瘀生新法 ，将 补阳还五汤精简为黄芪、川芎和地龙，经过二次开发而成的新型制剂。本课题组前期研究表 明，脑健片治疗脑缺血疗效显著 [1-2] ，现进一步对其代谢动力学进行研究， 选择补阳还五汤 类方均含有的阿魏酸、洋川芎内酯 a藁本内酯3种入血成分为检测指标，研究大鼠灌胃后 体内药代动力学参数变化，旨在探讨精简方配伍变化后其同类成分的药物动力学变化行为。 材料与方法 药物与试剂 补阳还五汤干浸膏（黄芪 120 g,当归6 g，赤芍4.5 g,川芎3 g,红花3 g，桃仁3 g， 地龙3 g）和脑健片干浸膏（黄芪 30 g，川芎9 g，地龙6 g）均由湖南省中医药研究院中药 所张水寒教授提供, 所有药材质量均符合 2010年版《中华人民共和国药典》 标准。补阳还五 汤按传统水煎法浓缩干燥后制备成干浸膏,相当于原药材 4.5 g/g 。脑健片按新工艺制备, 其中川芎以挥发油量为考察指标, 对川芎粗粉进行 sfe-co2 萃取, 不加夹带剂, 提取 1.5 h； 地龙以醇浸膏得率及氮含量为指标，温浸 2次，第1次加5倍量50%乙醇温浸48 h，第2次 加 4倍量 50%乙醇温浸 48 h ；再合并药渣，与黄芪药粉一同水煎，所有药液浓缩干燥后即得 干浸膏,相当于原药材 4.7 g/g 。 阿魏酸对照品（批号must）、洋川芎内酯a对照品（批号must）、藁 本内酯对照品（批号 must-）,北京盈泽纳新化工技术研究院；乙腈,美国 tedia 公司,色谱纯；甲醇,美国 tedia 公司,色谱纯；怡宝纯净水（华润怡宝饮料有限公司） ,其 他试剂均为分析纯。 仪器 instech 自动采血系统 （ instech solomon 公司）,离心浓缩仪 （ centri vap , labconco ）, agilent-1260 型高效液相色谱仪,配有自动进样器,四元梯度泵,在线真空脱气机,柱温箱 和二极管阵列检测器（dad）；超声波清洗仪（sb-3200d，宁波新其生物科技股份有限公司）， 分析天平（ja-3003，上海恒平科学仪器有限公司），elipse xdb-c18色谱柱（250 mnX 4.6 mm 5 ?m，安捷伦公司）。 动物 spf级雄性sd大鼠20只，9?10周龄，体质量260?300 g，湖南斯莱克景达实验动物 有限公司，许可证号 scxk （湘）2011-0003。室温无菌喂养，自由饮食饮水。 分组、给药及处理 建立大鼠实时活体采血方法。 将 sd 大鼠麻醉后固定于手术台上， 切开颈下静脉， 分离颈 静脉，埋线，待血液充盈时用眼科剪将颈静脉剪开一小口，插入特制 pu软管约20 mm深并固 定，缝合伤口。灌胃后将插管大鼠与 instech 自动采血系统连接。将颈静脉插管的健康 sd 大鼠分为补阳还五汤组和脑健片组，每组 5只。二方均以 4倍于人体剂量的原药材给药 [3] ， 折算成干浸膏量分别为 12.04 g/kg 体质量和 9.64 g/kg 体质量。灌胃前采血作为空白血浆， 再分别于 5、15、30、45、60、90、120、180、240、300、360、48