(完整版)新型植物基因组DNA快速提取试剂盒使用说明书.docxVIP

◆ 新型植 物基因组 DNA 快速提取试剂盒 ◆ 目录号 DN15 ◆ 使用手册 ◆ 实验室使用 ，仅用于体外 杭州昊鑫生物 新型植物基因组 DNA 快速提取试剂盒 目录号： DN15 目录编号 包装单位 DN1501 50次 DN1502 100次 DN1503 200次 适用范围： 适用于快速提取植物组织、细胞、真菌基因组DNA 杭州昊鑫生物 - 1 - 试剂盒组成、储存、稳定性： 试剂盒组成 保存 50 次 100 次 200 次 RNase -20℃ 250 μl 500 μl 1 ml A(10mg/ml) 缓冲液 AP1 室温 25 ml 50 ml 100 ml 缓冲液 AP2 室温 10 ml 20 ml 40 ml 15 ml 25 ml 50 ml 缓冲液 AP3/E 室温 第一次使用前按说明加指定量乙 醇 15 ml 25ml 50ml 漂洗液 WB 室温 第一次使用前按说明加指定量乙 醇 洗脱缓冲液 EB 室温 15 ml 20 ml 40 ml 吸附柱 AC 室温 50 个 100 个 200 个 收集管（ 2ml） 室温 50 个 100 个 200 个 本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。 储存事项 : 裂解液 AP1 、AP3/E 低温时可能出现析出和沉淀 ，可以在 65℃水浴几分钟帮助重新溶解（ AP3 加入乙醇前可加热，加入乙醇后不可加热） ，恢复澄清透明后冷却到室温 即可使用。 2.  避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、 氧化、 pH 值变化， 各溶液使用后应及时 盖紧盖子。 杭州昊鑫生物 - 2 - 产品介绍： 该试剂盒采用 DNA 吸附柱和新型独特的溶液系统，适合于从含酚类、多糖类和 酶抑制物的植物样品中快速简单地提取基因组 DNA 。可在 30 分钟内完成一个或多个 100mg 新鲜或 20mg 干燥的植物样品 DNA 的纯化工作。 提取过程不需要用到有毒的酚 氯仿等有机物抽提，也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀，并能快速高效地去除多 糖类、酚类和酶抑制物等杂质，纯化的 DNA 可直接用于 PCR、酶切和杂交等实验。 新鲜或干燥的植物组织（细胞）磨碎后经裂解液裂解；蛋白质、多糖、细胞残片 被沉淀去除； 然后基因组 DNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤 , 进一步将多糖， 多酚和细胞代谢物， 蛋白等杂质 去除， 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组 DNA 从硅基质膜上洗脱。 产品特点： 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 3. 快速，简捷，单个样品操作一般可在 1 小时内完成。 4. 数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280 典型的比值达 1.7～1.9，可直接用于 PCR， Southern-blot 和各种酶切反应。 杭州昊鑫生物 - 3 - 注意事项 所有的离心步骤均在室温完成， 使用转速可以达到 13，000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 开始实验前将需要的水浴先预热到65℃备用。 3. 缓冲液 AP3/E 中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套， 和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。  避免沾染皮肤，眼睛 不同来源的植物组织材料中提取 DNA 的量会有差异， 一般 100mg新鲜组织典型产量可达 3- 25μg。 洗脱液 EB 不含有螯合剂 EDTA ， 不影响下游酶切、连接等反应。 也可以使用水 洗脱， 但应该确保 pH 大于 7.5， pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱 DNA 应该 保存在－ 20℃。DNA 如果需要长期保存， 可以用 TE 缓冲液洗脱 （10mM Tris-HCl ， 1mM EDTA ，pH 8.0 ），但是 EDTA 可能影响下游酶切反应， 使用时可以适当稀释。 杭州昊鑫生物 - 4 - 操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示： 第一次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及 时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入 ! 第一次使用前请先在缓冲液 AP3/E 中加入指定量无水乙醇 ! 取适量植物组织（新鲜组织 100 mg 或干重组织 20 mg，可适当多取一些样品弥补粘在研钵上的损失）在研钵中加入液氮充分碾磨成细粉。 研磨前，可准备一个 1.5ml 离心管，加入 400μl缓冲液 AP1 和 4μl RNase A( 10 mg/ml) 室温备用。 2. 转移细粉（新鲜组织 100 mg 或干重组