生物化学与分子生物学：第16章 RNA的生物合成.pptxVIP

第16章;RNA;在生物界，RNA合成有两种方式：;转录的知识是理解许多生物学现象和医学问题所必需的。 对于RNA生物过程的调节可以导致蛋白质合成速率的改变，以及由此而引发的一系列代谢变化， 因此，了解RNA代谢的基本原理就甚为重要。这些原理既关系到所有生物是如何适应环境变化的，也关系到细胞结构和功能的分化机制。 ;本章内容;原核生物转录的模板和酶 Templates Enzymes in Prokaryotic Transcription;本节教学大纲;生物体以DNA为模板合成RNA的过程。;参与转录的物质 (反应体系)：;转录的特点;不对称转录 (asymmetric transcription) 在DNA分子双链上，按碱基配对规律，能指导转录生成RNA的一股链作为模板指导转录，另一股链不转录，这种模板的选择性，称为不对称转录。;DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链 (template strand)。 与模板链相对的另一股单链，不用作转录模板，其碱基序列除T／U有别外，和转录产物RNA序列相同，称为编码链 (coding strand)。;5′·····GCAGTACATGTC····· 3′ 3′·····CGTCATGTACAG····· 5 ′ 5 ′····GCAGUACAUGUC ···3 ′ N??? Ala Val His Val ???C;5? 3?;二、RNA pol催化RNA合成;依赖DNA的RNA pol催化RNA合成的机制 ;DNA pol在启动DNA链延长时需要引物存在，而RNA pol不需要引物就能直接启动RNA链的延长。 RNA pol和双链DNA结合时活性最高，但是只以双链DNA中的一股DNA链为模板。 RNA pol与DNA的特殊序列启动子(promoter) 结合后，就能启动RNA合成。 ;（二）RNA pol由多个亚基组成;19;20;α 决定哪些基因被转录 β 催化聚合反应 β′ 结合模板，双螺旋解链 σ 辨识起始点，结合启动子;大肠杆菌内有一些不同的RNA pol全酶，其差异是σ亚基的不同。目前已发现多种σ亚基，并用其分子量命名区别，最常见的是σ70(分子量70 kDa)。σ70是辨认典型转录起始点的蛋白质，大肠杆菌中的绝大多数启动子可被含有σ70因子的全酶所识别并激活。 但有些基因的启动子，如热激蛋白也为另外的σ亚基(σ32)识别。;三、RNA pol结合到DNA的启动子上启动转录;调控序列中的启动子(promoter)是RNA pol结合的部位，也是控制转录的关键部位。原核生物以RNA pol全酶结合到DNA的启动子??而启动转录，其中由σ亚基辨认启动子，其他亚基相互配合。;RNA pol保护法;;RNA pol全酶在转录起始区的结合:;28;29;复制和转录的异同;31;32;33;原核生物的转录过程 The Process of Transcription in Prokaryote;熟悉：原核生物RNA转录过程——转录起始、延长、终止。 ;原核生物的转录过程分为三个阶段 ;RNA pol必须准确地结合在转录模板的起始区域。 DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。;RNA pol全酶(?2????)与模板结合，形成闭合转录复合体 (closed transcription complex)； DNA双链局部解开约17bp，形成开放转录复合体 (open transcription complex) ； 在RNA pol作用下发生第一次聚合反应，形成第一个磷酸二酯键。;原 核 生 物 转 录 起 始 过 程;磷酸二酯键的形成;二、RNA pol核心酶独立延长RNA链;转录的延长;转录泡：在转录延长过程中，DNA双链需解开约17bp，形成的局部单链区象一个小泡，称为转录泡。;为了保持局部的转录泡状态，在RNA pol下游的DNA需不断解链，可使其下游的DNA（未解开双链部分）越缠越紧，形成正超螺旋，而其上游DNA变得松驰，产生负超螺旋，需要解旋酶和拓扑异构酶来消除这些现象。;45;原核生物转录过程中的羽毛状现象;依赖ρ因子的转录终止 非依赖ρ因子的转录终止;（一）依赖ρ因子的转录终止;ρ因子的作用原理：;依赖ρ因子的转录终止过程：;（二） 非依赖ρ因子的转录终止;RNA ;茎环结构使转录终止的机制;非依赖ρ因子的转录终止过程：;小 结;56