精选幻灯片乙型肝炎.ppt

5 3 3 3 3 5 3 3 5 3 3 循环 2 4 个拷贝 循环 3 8 个拷贝 3 3 5 3 3 5 3 3 5 3 3 5 3 3 5 3 3 5 3 3 5 3 3 TaqMan 探针 5 5 3 3 d . NTPs Taq 酶 Primers 反应体系 变 性 Taq l R Q Probe R Q 5 3 R Q 退 火 5 3 1. 链取代 Taq Q R 5 3 Q Taq R 5 2. 水 解 3. 聚 合 5 3 Taq R 5 4. 检测荧光 5 3 Taq R 5 l ? 每产生一条 DNA 链，就切断一条探针 ? 每切断一条探针，就产生一个荧光信号 ? 信号强度与结合探针的 DNA 分子数成正比 原理图 血清标本采集 一次性无菌注射器抽取受检者静脉血 3-5 毫升，注入红帽无菌管中 室温（ 22 ～25oC）放置 30 ～ 60 分钟 血标本使用水平离心机， 4000 转 / 分，离心 5 分钟 吸取上层血清，转移至 1.5ml 灭菌离心管 严禁使用肝素抗凝血标本，抑制 PCR 反应 结果分析 实验室检查常用指标？ 常用指标 ? 免疫学检查 ? 病毒学检查 ? 肝功能检查 指标 HBsAg 抗 -HBs HBeAg 抗 -HBe 抗 -HBc 诊断 结 果 + + + 大三阳，急性或慢性现症感染， 传染性强 + + + 小三阳，有无传染性应结合 HBV DNA 检测结果 + + HBV 感染恢复期，或 S 基因突变， + + 急性肝炎早期，传染性强 + + 既往感染，有无传染性需结合 HBV DNA + + 感染恢复期，有免疫力，无传染 性 + + ①窗口期，抗 -HBs 即将出现； ② HBV 感染已过 + ①注射疫苗后；②遥远的过去有 过 HBV 感染 免疫学检查 ------- 乙肝五项分析 ? 乙型肝炎病毒 DNA(HBV DNA ＜ 10 3 copy/ml) ? 乙肝病毒基因型检测 ? 乙肝病毒基因型变异检测 病毒学检查 ? 肝功能检查 - ALT 、 AST ：一般可反映肝细胞损伤程度，最常用 - 血清胆红素 (BIL) ：通常与肝细胞坏死程度有关 - 凝血酶原时间 (PT) ：反映肝脏凝血因子合成功能 - 胆碱酯酶 (ChE) ：反映肝脏合成功能，可作参考 - 白蛋白 (ALB) ：反映肝脏合成功能， A/G 可作参考 - 甲胎蛋白 (AFP) ：出现明显升高往往提示发生 HCC 如何治疗？ ★ 目前极少能治愈！ ★ 是可以治疗的！ ★ 病毒 DNA 整合于宿主肝细 胞染色体 能治愈吗？ 慢性乙型肝炎 主要内容 ? 乙型肝炎病毒 ? 荧光定量 PCR 技术 ? HBV-DNA 与临床 什么是乙肝？ 乙肝： 是指由 乙型肝炎病毒 引起的，以肝脏损 害为主的一组全身性传染病。 临床表现： 以疲乏、食欲减退、厌油、肝功能异 常为主，部分病例呈现黄疸。 一、形态和生物学特性： HBV 感染者血清中存在三种形式的病毒颗粒： ①大球形颗粒（ Dane ）：完整的病毒颗粒，含量最少 包膜： HBsAg ，糖蛋白，脂质 核心： DNA ， DNA 聚合酶， HBcAg 是病毒复制的主体。 ②小球形颗粒： 仅 HBsAg ，无核酸，无感染性，含量最多 ③管形颗粒：仅 HBsAg ，无核酸，无感染性 HBV 抵抗力很强，在血清中 30-32 ℃可保存 6 个月， -20 ℃可保存 15 年。 电镜下 HBV 颗粒 HBV 病毒结构示意图 HBV 基因组结构， 1979 年 二、基因组结构和编码蛋白 ? 根据 HBV 全基因序列差异 ≥ 8%