生物制药学--第九章--基因治疗与反义药物复习过程.ppt

生物制药学--第九章--基因治疗与反义药物;严重联合免疫缺陷病;2004年12月27日，英国《柳叶刀》杂志报道，英国伦敦的医生近日用基因疗法为严重联合免疫缺陷儿童进行治疗获得成功 4位患有严重联合免疫缺陷的儿童已被基因疗法治愈，使利用基因疗法治疗严重联合免疫缺陷的成功案例增加到了18例 ; 第九章 基因治疗与反义药物 ;第一节 基因治疗概论 ;一、基因治疗的概念 ;; p53;二、基因治疗的方法 ;1. 基因增补 ;基因治疗实例;ADA-Gene + vector （逆转录病毒） 重组分子 患者T Ly C IL-2刺激C分裂 导入 细胞生长分裂 10天 Gene表达 回输患儿体内 1~2月治疗一次, 10个月 患儿体内ADA水平达正常人的25% ;2. 基因替换;3. 基因修复 ;4. 基因失活 ;5. 免疫基因的治疗 ; 黑色素瘤的基因治疗;细胞因子基因治疗和肿瘤坏死因子基因治疗;6. 自杀基因治疗 ;“自杀基因” 疗法;“自杀基因” 疗法;“自杀基因” 疗法;“自杀基因” 疗法;7. 耐药基因治疗 ;三、基因治疗的途径 ;1. ex vivo ; 乙型血友病;逆转录病毒载体 +FⅨcDNA 重组体 5` LTR FⅨ neo SV PSO LTR 3` ①导入仓鼠细胞（CHO ）→FⅨ表达； ②导入乙型血友病患者皮肤成纤维细胞（体外培养）→FⅨ表达； ③91年，导入乙型血友病患者皮肤成纤维细胞（体外培养）→回植病人皮下→FⅨ基因表达，FⅨ基表达水平达正常人的5%。 是我国基因治疗成功的例子。;2. in vivo ; 单纯疱疹病毒 哺乳动物细胞 HSV Gene-TK （在肿瘤细胞中表达，正常细胞中不表达） Gene—TK GCV（胸苷类似物,丙氧鸟苷） TdR P p GCV---p 抑制DNA合成 脱氧胸苷酸 肿瘤细胞死亡 邻近细胞死亡/凋亡（旁观者效应）;第二节 基因治疗的步骤和问题 ;一、 基因治疗的步骤;基因治疗的步骤 ;二、基因治疗中的问题 ;第三节 疾病的基因治疗 ;一、基因治疗与肿瘤 ;1. 导入细胞因子基因进行治疗 ;2. 导入MHC的基因治疗 ;MHC表达的抗原分为I类和II类 I类抗原分子的正常功能是提供递呈抗原 肿瘤细胞上I类抗原的MHC表达很弱或者不表达，使机体免疫应答不能发生 导入MHC的I类抗原基因，可以诱导机体对肿瘤细胞的免疫应答，从而达到杀伤肿瘤细胞的目的 ;3. 导入抑癌基因的基因治疗 ;p53基因 ;p53基因的突变以点突变为主，基因重排和缺失很少见 结肠、肺、膀胱、乳腺、干、食管、卵巢、皮肤等组织中p53基因的突变率非常高 p53基因产物是393个P53蛋白 将野生型的p53基因导入细胞进行表达，从而达到基因治疗的目的;RB基因 ;RB蛋白是一种DNA结合蛋白，调节多种与细胞周期增值有关基因的转录，并最终影响细胞周期的进程 RB蛋白有磷酸化和非磷酸化两种形式，非磷酸化状态的RB蛋白为活性形式蛋白，