11101054α-葡萄糖苷酶抑制剂[宣讲].pptVIP

PNPG法 以PNPG为底物测定中草药提取物或降糖活性成分对α-葡萄糖苷酶抑制活性大小,从中草药中筛选强活性降糖活性因子是目前最常用、最经典的筛选方法。 这一筛选方法的建立为α-GI的体外筛选奠定了基础,被公认对α-GI的研究具有里程碑式意义。筛选过程经济、快捷,并可进行体外直接筛选,因此,这一筛选模型特别适用于α-GI的初步筛选。 由于该模型只能筛选到对麦芽糖酶有强活性的抑制类药物,无法筛选到同时对α-淀粉酶、蔗糖酶、麦芽糖酶等α-糖苷酶具有抑制作用的α-GI,更是无法直接评价筛选得到的降糖物质在体内的药效作用。因此。该方法筛选得到的α-GI假阳性率高、体内外活性差异较大或体内活性低、临床效果不理想。 * 精品PPT | 借鉴参考 葡萄糖氧化法 以淀粉、蔗糖、麦芽糖等α-葡萄糖苷酶直接水解物为底物的筛选模型的具体筛选过程与以PNPG为底物的筛选模型基本相同,只是所用底物不同。 具有以下优点: (1)具有PNPG底物筛选模型的经济、快捷,可在体外进行筛选等优点; (2)筛选得到的α-GI靶向作用具体,作用机制确切。α-淀粉酶、蔗糖酶、麦芽糖酶等α-葡萄糖苷酶是体内碳水化合物消化吸收的关键酶,其作用底物分别为淀粉、蔗糖、麦芽糖等。如果一种物质抑制α-淀粉酶水解淀粉、或抑制蔗糖酶水解蔗糖、或抑制麦芽糖酶水解麦芽糖,则该物质就具有相应酶抑制活性;如果同时具有2种或2种以上的酶抑制作用,则该物质就具有2种或2种以上相应酶的抑制活性; (3)与PNPG底物筛选模型相比,假阳性率较低。另外,这种筛选模型还具有定向筛选的特点。 * 精品PPT | 借鉴参考 基于上述优点,第二代酶-抑制剂筛选模型是一种行之有效的筛选方法。虽然早已有从人胰腺和唾液中成功分离纯化出α-淀粉酶的报道,但由于其材料来源有限,无法形成规模化生产,价格极其昂贵。因此,近年来的以淀粉、蔗糖、麦芽糖为底物的酶-抑制剂筛选模型所使用的α-淀粉酶大多为猪胰型酶,蔗糖酶、麦芽糖酶等,其他α-葡萄糖苷酶大多来源于酵母。猪、酵母的遗传型存在的差异造成它们所表达的酶也必然有差异。这一事实使该筛选模型无法做到与糖尿病患者体内情况完全一致,也无法直接评价α-GI的体内药效,最终还需要高血糖动物做药理试验研究。 * 精品PPT | 借鉴参考 高血糖动物筛选模型 思路:首先构建高血糖动物模型,然后将待筛样品注射或灌胃该动物模型,通过观察动物血糖浓度的变化评价该样品的药效作用大小,最后进行作用机制和作用靶位的研究。其主要包括四氧嘧啶、肾上腺素、氨基葡萄糖等所致的动物高血糖模型和原发性糖尿病小鼠(NOD小鼠)模型。 采用该筛选模型筛选药物的突出困难是:实验周期长,耗资大[15]、化合物用量大、难度大,无法做到同时进行上百种中草药或其成分筛选,更不能阐明其作用的有效成分及作用特定靶点。但具有检测方法比较深入细致、结果相对可靠等优点。因此基于高血糖动物模型的方法不太适合大量筛选的要求,但可用于进一步的生物活性验证。 * 精品PPT | 借鉴参考 3. 不同来源的α-葡萄糖苷酶抑制剂 阿卡波糖 米格列醇 伏格列波糖 陆生动植物 海洋生物 天然产物或微生物发酵产物为母体,通过化学半合成的方法 * 精品PPT | 借鉴参考 3.1 微生物来源 阿卡波糖 1977年，德国拜尔公司在游动防线(Actinoplanes)SE50，SE82和SE18的代谢产物中提取出近似低聚糖(寡糖）的抑制α-葡萄糖苷酶活性物质[20]。经过深入研究，德国拜耳(Bayer）公司1990年在欧洲和拉丁美洲推出了第一个α-葡萄糖苷酶抑制剂——阿卡波糖(Acarbose），商品名拜糖平[21，22]。 * 精品PPT | 借鉴参考 阿卡波糖（图1-1）是一种低聚糖(假性四糖），它由一个不饱和的环多醇，一个脱氧己糖和一个麦芽糖组成。其中不饱和的环多醇起主要的抑制作用，它能有效的抑制淀粉酶，糖感酶及糖基转移酶的活性[23]。 动物实验结果表明，阿卡波糖延缓了肠道内多糖，寡糖或双糖的降解使来自碳水化合物的葡萄糖的降解和吸收入血速度变缓，从而降低了餐后血糖的升高，使餐后平均血糖值下降。阿卡波糖也能阻止或降低糖耐量低减者的餐后血糖，主要用于防治Ⅱ型糖尿病。在老年糖尿病人中，阿卡波糖可以通过增加胰岛素的敏感性而起到控制餐后高血糖和改善HbA1C(糖化血红蛋白）含量的作用[24]。另外Lilliana C.等人通过临床研究发现，阿卡波糖可以通过调节胰岛素及性激素水平治疗胰岛素分泌过多患者的粉刺和多囊卵巢综合症[25]。PeterS.等人报道阿卡波糖对先天性高血糖反应的控制有良好的疗效[26]。 * 精品PPT | 借鉴参考 YamagishiS.等报道阿卡波糖能够通过改善甘油三酸酯水平，改善体重和血管收