范本第五章 原核生物基因表达调控.pptVIP

* 三、lac operon 的其它问题 lac operon的功能是在正负两个调控体系的协调作用下实现的。阻遏蛋白封闭转录时，CAP不发挥作用（葡萄糖和乳糖都不存在）；如没有CAP加强转录，即使阻遏蛋白从operator上解聚仍无转录活性（葡萄糖和乳糖同时存在的情况下）； CAP组成型合成，所以cAMP－CAP复合物取决于cAMP含量; 最新.课件 * 腺苷酸环化酶位于细胞膜上，其活性与葡萄糖运输的酶有关，因此cAMP－CAP调控乳糖、半乳糖、阿拉伯糖等糖类代谢有关的酶; 降解物敏感型操纵元：只要有葡萄糖存在，这些操纵元就不表达。 最新.课件 * 2. A基因及其生理功能 编码β -半乳糖苷乙酰基转移酶，使半乳糖苷乙酰化。该酶不参与乳糖代谢！ 生理意义：在细胞中有许多能被半乳糖苷酶降解的半乳糖苷类物质，其分解产物不能进一步代谢，积累，抑制细胞生长。半乳糖苷乙酰化后，即无毒。所以lacA虽不在乳糖降解中起作用，但可抑制有害物质的积累。 最新.课件 * 3. lac基因产物数量， 1：0.5：0.2 不同酶的数量差异，是由于在翻译水平上的调节。 方式有二: 核糖体脱离: 多顺反子的差别性翻译; 内切酶作用: 在lac mRNA分子内部，a基因比z基因更易受内切酶作用. 最新.课件 * 最新.课件 * 生物细胞中的氨基酸合成， 也受操纵元的调节。细胞需要某种氨基酸时，其基因即表达，不需要时基因关闭，达到经济的原则。 第三节 色氨酸操纵子与负控阻遏系统 最新.课件 * trp操纵子的组成 邻氨基苯甲酸合成酶 吲哚甘油磷酸合成酶 色氨酸合成酶 邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶 最新.课件 * trpR, 阻遏蛋白 P，-40~+18 O, -21~+1 L, +1~+162 结构基因 一、 trp操纵子的结构 大肠肝菌中的 trp 操纵子 最新.课件 * trp操纵子的结构 操纵区 启动子区（P） 操纵子（O） 弱化子区（a） 结构基因 E : 邻氨基苯甲酸合成酶 （与G基因为融合基因） C : 吲哚甘油磷酸合成酶 B : 色氨酸合成酶α亚基 D : 邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶 A : 色氨酸合成酶β亚基 前导区 (L) 最新.课件 * 二、Trp operon 的阻遏系统 1、Trp R 四聚体 最新.课件 * 阻遏蛋白＋trp → 有活性的阻遏物 ＋trp O →不转录 最新.课件 * 2、阻遏蛋白的结合位点 trpO -21 ~ +1，反向重复序列 trpP -40 ~ +18 活性阻遏物与trpO 的结合，RNA pol与启动子的结合发生竞争。 最新.课件 * 3、阻遏系统 主管转录是否启动， 在缺乏Trp时， mRNA起始合成，但不能自动延伸，一般在trpE之前终止转录。 粗调开关 最新.课件 * 色氨酸操纵子: 由与色氨酸合成相关的 基因及其调控序列组成。当缺乏色氨酸时，trp 操纵子基因表达；当外源色氨酸含量较高时，操纵子中的基因受到阻遏。 trp操纵子的阻遏系统 色氨酸调节（trpR） 基因突变会引起 trp mRNA的组成型合成。只有在色氨酸存在的情况下，阻遏蛋白与之结合形成有活性的阻遏物，与操纵区结合关闭trp mRNA的转录。 最新.课件 * 三、弱化子对基因表达的调节 阻遏发生时，转录的起始频率下降到 1/70，但 trp 酶系统活性却下降到 1/600。 弱化作用（attenuation）：是指控制一些细菌操纵子转录终止的调节。 弱化子（attenuator）：是指弱化所发生的终止子序列，并且这种终止是被调节的，这段序列就称为弱化子。 1、弱化子（attenuator） 最新.课件 * 2、前导区：在 trp mRNA 5’ 端 trpE 基因的起始密码子前有一个长162 bp 的 mRNA片段，被称为前导区。 前导肽：由前导序列指导合成的含有14个氨基酸残基的肽称为前导肽。 前导序列结构特点：第10和11位两个密码子为色氨酸密码子。 最新.课件 * 弱化子，衰减子，α 前导RNA，140bp 最新.课件 * 弱化子， 衰减子，α 最新.课件 * 前导肽14aa 最新.课件 * 3、trp mRNA 前导序列结构 最新.课件 * trp 缺乏 tRNAtrp也少 核糖体通过两个trp 密码子的速度慢，占据前导序列的trp