禽流感实验室检测技术方案[学习].pdfVIP

禽流感实验室检测技术方案 一、实验室网络设置 实验室网络由中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家流感中 心和省级流感实验室两级组成。 二、实验室条件及生物安全操作的要求 1、省级流感实验室实验条件及生物安全的操作要求 （1）实验生物安全要求：安全Ⅱ级 + （BSL-2 级 + ）或安全Ⅲ级 （BSL-3 级）。 （2 ）特异性 H5 的 RT-PCR 病毒核酸检测、血清学检测中用到的血 凝抑制实验（ HI ）可以在安全Ⅱ级 + （BSL-2 级+ ）实验室里操作。 （3）特异性 H5 的 RT-PCR 病毒核酸检测在安全Ⅱ级 + （BSL-2 级 + ）实验室的生物安全柜里提取病毒的核酸，进行病毒核酸检测的实验 室要求请参照国家有关核酸检测要求的规定。 （4 ）微量中和实验、特异性 H5 的 RT-PCR 病毒核酸检测阳性的采 样标本的病毒分离、尸检标本的检测必须在安全Ⅲ级（ BSL-3 级）实验 室里操作。 （5）省级流感实验室实验条件：具备进行禽流感相关临床标本初 筛所需的生物安全柜、离心机、 PCR 仪、电泳仪、紫外线检测仪等配套 设备。 2、国家流感中心 实验生物安全要求：生物安全Ⅱ级 + （BSL-2 级+ ）和生物安全Ⅲ级 （BSL-3 级）实验室。 3、省级流感实验室职责 （1）禽流感采样标本的临床标本特异性 H5 的 RT-PCR 病毒核酸检 测； （2 ）禽流感 H5 的血清学检测工作； （3）特异性 H5 的 RT-PCR 病毒核酸检测阳性标本的病毒分离必须 在生物安全Ⅲ级（ BSL-3 级）实验室； （4 ）没有生物安全Ⅲ级（ BSL-3 级）实验室的，将标本送国家流 感中心做病毒的分离工作。 4、国家流感中心实验室职责 （1）国家流感中心设立在中国疾病预防控制中心病毒病预防控制 所流感室； （2 ）对各省报告的禽流感疑似病例或确诊病例进行复核、确认； （3）对不具备禽流感病毒分离条件的省份送检标本的检测、分离 和确认； （4 ）对需要做微量中和实验的血清标本进行微量中和试验； （5）对各省级实验室检测人员的培训； （6 ）对各省级流感实验室的质量控制。 三、原始标本采集 1、标本采集人员 医疗机构的医生、护士或当地疾病预防控制中心专业人员负责标本 采集并填写标本登记表，标本采集人员按照《禽流感职业暴露人员防护 原则》做好个人防护。 2、标本采集种类和时限 （1）采集标本的种类：疑似禽流感患者的咽、鼻拭子或含漱液、 血清以及死亡病例的尸检肺组织、气管分泌物。 （2 ）采集标本时间： ①咽、鼻拭子或含漱液在发病的头 3 天采集； ②急性期血清在发病后 7 天内采集，恢复期血清在发病后 2-4 周采集； ③尸检标本尸检时采集。 3、标本的运送：所有采集的标本应在医院采集时立即分装，一式 二份，其中一份单独保存，以备复核。采集的标本若不能在 24 小时内 送达，则应尽快在－ 70 ℃以下保存。无－ 70 ℃条件的需在－ 20℃冰箱 短时间暂存，并尽快联系递送标本。 4、标本采集的方法：详见国标《流行性感冒诊断标准及处理原 则》。 四、送流感中心的标本包装、运送与接收 1、标本的包装 （1）标本必须放在大小适合的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料管里， 拧紧。