培养基平板用途.docx

血琼脂培养基 【用途】适用于各类需氧及兼性厌氧细菌生长， 一般细菌学检验标本的分离培养、 溶血鉴别及菌种保存 【原理】羊血或兔血时细菌生长繁殖的良好营养物质。在 45°C?50°C的基础培 养基中加加入血液(5?10%可以保存血液中某些不耐热的生长因子， 同时血细 胞不被破坏。若将NaCI的浓度提高到0.85%,则可使血平皿经35C 18?24h后色 泽仍然鲜艳。 在血平板上除可以观察菌落的形态外， 还可以判断溶血的情况： 菌 落周围的培养基内红细胞完全破坏为溶血。菌落周围呈绿色为a溶血。溶血的情 况可以显微镜下用低倍镜观察 【成分】牛肉浸出液1L蛋白胨10氯化钠5琼脂15无菌脱纤维羊血60ml p H 7 .2 ?7.4 【制备】将前四项成分混合，加热溶化，校对pH,置三角瓶内，高压灭菌(121C 15min)后冷至约50C，加入无菌纤维羊血，旋转式充分摇匀后倾平板。血琼 脂层厚4mm凝固后，抽样置于35C培养18?24h，如无菌生长，冷藏备用。 【接种】取标本增菌培养物或纯培养物划线接种到平板上，置 35 C培养1?2d， 观察结果 【观察结果】 在血平板上除可以观察菌落的形态外， 还可以判断溶血的情况： 菌 落周围的培养基内红细胞完全被破坏为溶血，菌落周围呈绿色为a 【质量控制】化脓性链球菌，ATCC19615生长良好，-溶血。肺炎链球菌，ATCC6303 为a溶血。表皮葡萄球菌，ATCC12228生长良好，不溶血。 ★巧克力培 养基 【用途】主要用于嗜血杆菌的分离，亦可用于奈瑟菌的增菌培养。 【原理】流感嗜血杆菌培养时，需要依赖血液中的X及V因子方能生长繁殖，当 培养基加热至80?90C时，可使血液中的红细胞破裂，以利于嗜血杆菌，奈瑟 菌等的生长培养。 凡疑有这些菌种存在的标本， 均应接种巧克力平板。 血液标本 培养，增菌后又细菌生长，若移种巧克力平板上，有利于分离更多的细菌。 【成分】牛肉浸出液1L蛋白胨10氯化钠5琼脂15无菌脱纤维马血、羊血或兔 血 100mlpH7 .2?7.4 【制备】将前四项成分混合，加热溶化，校对 pH,高压灭菌(121C 15mi n)后 在80?90C以无菌方法加入血液，摇匀后置 90C水浴中。维持该温度15min, 使之呈巧克力色取出，至室温冷至约 50C，倾制平板。凝固后，抽样置于35C 培养18?24h,如无细菌生长，冷藏备用。 【接种】将可疑标本直接划线接种于该培养基上，置 35C普通培养或置含5%? 10%^氧化碳环境培养18?24h，取出观察细菌生长状况。 【观察结果】流感嗜血杆菌菌落微小 (0.8mm), 无色透明、光滑整齐、似露滴状， 48h后达1.5mm从血液或脑脊液中分离的菌落往往形成液状，菌落较大，老培 养物菌落中心呈凹陷。 【质量控制】流感嗜血杆菌 ATCC1021，1 生长良好，菌落典型。肺炎链球菌， ATCC630，5 生长良好，菌落典型。 【保存】置冰箱， 1 周内用完。 ★营养肉汤 【用途】用于一般细菌的增加培养，加入 1%的琼脂粉亦可作营养琼脂。 【原理】该培养基含有氮及微量无机盐， 适宜一般细菌的生长繁殖， 因此是最基 础的培 养基。 【成分】牛肉浸液1L蛋白胨10氯化钠5pH7.2?7.4 （牛肉浸液可用3.0g牛肉 膏和 1L 蒸馏水代替） 【制备】上述各成分混合溶解，校正pHo分装试管，每管3?5ml。高压灭菌（121C 15min）,做无菌试验后冷藏备用。 【质量控制】金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、化脓性链球菌均生长良好。 ★肉浸液培养基 【用途】供作基础培养用。 营养比肉膏汤好， 一般营养要求不高的细菌均可生长。 【原理】牛肉含有丰富的营养物质，如蛋白质、碳水化合物及无机盐类等，通过 水解并用 Nacl 【成分】新鲜牛肉 500 蛋白胨 10 氯化钠 5 蒸馏水 1LpH7.4? 7.6 【制备】 1.将新鲜牛肉去除脂肪、肌膜及肌腱，切成小块后用绞肉机绞碎 （或用 刀剁碎）。取500g碎肉，加蒸馏水1L,混合后置冰箱中冷浸过夜。 将肉浸液取出，煮沸 20?30min （并不断搅拌，以免沉底、烧焦） 。冷后，用 绒布或麻布挤压过滤，使所有的肉浸汁尽量挤出。 加入蛋白胨、氯化钠，加热溶解，补足蒸发的水分。矫正 Ph至7.4?7.6。 用滤纸过滤，装瓶。高压灭菌（121C 15min）即成肉浸液。 与1L肉浸液中加入2?3g琼脂，即成肉浸液琼脂。 【使用】根据用途不同可以制成营养肉汤， 以此为基础制成其他培养基。 如制作 固体培养基，加入琼脂 1.5?2%即成。 【质量控制】金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、伤寒沙门菌、痢疾志贺菌等均生长 良好。 【保存】置冰箱可使用较长时间。 ★蛋白胨水 【用途】 1.供细菌靛基质（吲哚）试验用 2.一般细菌培养和传代