质谱基础知识 飞行时间质谱仪原理及应用.pptVIP

飞行时间质谱仪 庞钧文 12210300012 ? 质谱仪是按照离子的质荷比 (m/z) 不同 , 来分离不同分子量的分 子 . 测定分子量进行成分和结构分析 . ? 离子的生成方式有失去或捕获电荷 ( 如 : 电子发射 , 质子化或去质 子化 ) 质谱仪简介 离子源 质量过滤 / 分析器 检 测 器 进样部分 样品板 LC 或 GC EI 源 FAB 源 MALDI 源 ESI 源 Quadruopole Ion trap Time-of-flight 电子倍增器 闪烁计数器 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + ++ +++ +++ +++ +++ 1906 年 J.JThomson 在实验中发现带电荷离子在电磁场中的运动 轨迹与 它的质荷比 (m/z) 有关 , 并于 1912 年制造出第一台质谱仪 . 1946 年 发明飞行时间质量分析器 (Time-of-flight Analyzer) 1953-1958 年 出现四极杆质量分析器 (Quadrupole) 1956 年 GC-MS 开始联用 1959 年 质谱首次用于 peptide sequencing 1965 年 离子共振质谱出现 1968 年 电喷雾离子源 Electrospray Ionization 1973 年 LC-MS 1974 年 Fourier transform ion cyclotor resonance MS 1987-1988 年 Matrise_assisted laser desorption ionization 1996 年 电喷雾离子源开始用于生物大分子的研究 质谱的发展历史 ? 利用动能相同的离子（ E ），飞行相同的距离（ L ），所用的时间的不 同（ T ）来将它们区分开来。 ? 通过测量离子的飞行时间 T ，来计算离子的质荷比（ m/z ） 。 ???? 2 2 = ?????? L = ???? m: 离子质量； v: 离子速度； ne: 离子总电荷； V: 离子所在地点的电势； L: 飞行距离； T: 飞行时 间 基本原理 L 2V V 基本原理 —— 公式推导 ) 1 ....( .......... ) )( 2 1 ( * ) )( 2 1 ( * 2 * ? ? ? ? n e m V L T ne m V L neV m L T 当飞行距离 L 和工作电压 V 一定时，离子飞行时间 T 和离子 质荷比一一对应。 ???? 2 2 = ?????? L = ???? ? 质量分辨（ Mass resolution, m/ △ m ）：质谱仪器分 辨不同成分物质的能力； ~10000 ? 质量精度（ mass accuracy ）：衡量质谱仪器测量物 质成分的准确度； ppm ? 质量范围（ mass range ）：质谱仪器测量物质成分 的质量大小范围； 1~ ∞ ? 灵敏度（ sensitivity ）：质谱仪器所能测量物质成分 的最低含量； 单分子检测 飞行时间质谱仪性能指标 ? 离子源： ? 电喷雾电离源（ ESI ） ? 主要用于极性、难气化的成分在液相状态下的电离。 ? 大气压化学电离源（ APCI ） ? 主要用于中等极性、易挥发的小分子化合物在气相状态下的电离 ? 基质辅助激光解吸电离源（ MALDI ） ? 主要用于多肽、核苷酸、蛋白质和高分子聚合物等生物大分子的 电离 ? 大气压光电离源（ APPI ） ? 主要用于芳烃、甾体等不宜用以上三种离子化的样品。 飞行时间质谱仪 TOF-MS 的构成 ? 质量分析器 ? TOF-MS 分辨率低的原因 ? 时间分散 ? 空间分散 ? 能量分散 ? 改进方法 ? 脉冲电离 ? 离子延迟引出 ? 反射器技术 飞行时间质谱仪 TOF-MS 的构成 目前 , TOF -MS 大都装有反射器 , 使离子 经过多电极组成的反射器后沿 V 型或 W 型路线飞行到达检测器 , 使得分辨率可 达 20 000 以上 , 最高检测质量可超过 300 000 Da, 且具有很高的灵敏度。 检测器 ? TOF-MS 一般选用微通道板（ MCP ） 离子检测器 MCP 由平行的圆筒型 微通道组成 , 当离子进入微通道时 产生二次电子 , 反射通过这些通道 时 , 不断产生更多的电子 , 每一通 道的放大倍数约 10 5 。 MCP 具有 响应速度快、灵敏度高和信噪比 高以及检测面积大等特点。 高真空系统（ 10 ?7 Pa ） ? 前级：旋叶式机械泵 ? 后级：涡轮分子泵 ? 直线型飞行时间质谱仪的 主要缺点：分辨率低。 ? 离子初始能量不同，使得 具有相同质荷比的离子达 到检测器的时间有一定分 布，