生物分离技术：Chapter 4 沉析.pptVIP

利用蛋白质沉淀大规模提纯白蛋白与免疫球蛋白的工艺 沉淀法回收柠檬酸流程图 萃取法和沉淀法提取茶多酚工艺图 本章思考题 1、常用的蛋白质沉淀方法有哪些？ 2、简述盐析的原理。 3、影响盐析的主要因素有哪些？ 4、简述有机溶剂沉析的原理。 5、简述等电点沉析的原理。 常用的有机溶剂沉析剂 乙醇：沉析作用强，挥发性适中，无毒常用于蛋白质、核酸、多糖等生物大分子的沉析； 丙酮：沉析作用更强，用量省，但因其沸点低，挥发损失大，对肝脏有一定的毒性，着火点低（闪点）等缺点，应用范围不广； 特点： 介电常数小，60%乙醇的介电常数是48 丙酮的介电常数是22 容易获取 致蛋白质变性作用要小（甲醇），口服毒性大。 挥发性适中,水溶性要好 有机溶剂沉析的特点 优点： 分辨率高；（相对于盐析作用） 溶剂容易分离，并可回收使用； 产品洁净； 缺点： 容易使蛋白质等生物大分子失活； 应注意在低温下操作； 成本高 易燃易爆 影响有机溶剂沉析的主要因素 温度：低温有利于防止溶质变性；有利于提高收率（溶解度下降）； 搅拌速度：散热 溶液pH值：原则是避免目标蛋白与杂质带有相反的电荷，防止共沉现象。（pI） 离子强度:离子强度低有利于沉析，0.01~0.05mol/L 样品浓度: 蛋白质：0.5~2%；粘多糖：1%-2% 稀：溶剂用量大，回收率低，但共沉淀作用小 浓：节省溶剂用量，共沉作用强，分