低剂量羧化黑碳--铅复合体暴露诱发ICR小鼠的毒性效应.pdfVIP

摘 要 目的：黑碳 （Black carbon ）是大气细颗粒物 （PM2.5 ）重要成分之一，由于其特 殊的理化特性，在远距离的大气运输过程中能吸附许多有毒有害物质 （如有机物和重 金属），黑碳在经过一系列复杂的非均相化学反应形成黑碳-污染物复合体粒子。由于 PM2.5 来源的多样，化学组分相当复杂，决定了黑碳-污染物复合体（如黑碳-重金属复 合体粒子）引起的体内毒性效应及健康风险尚不明确。因此，为了进一步评价黑碳- 重金属复合体粒子诱发的体内毒性效应，本研究模拟黑碳粒子在气-粒转化中吸附大气 中重金属的化学反应过程，人工制备了羧化黑碳-铅复合体粒子，对ICR 小鼠进行了低 剂量中长期暴露，以探讨羧化黑碳-铅复合体粒子诱发多个靶器官的系统毒性效应和病 理特点，以期为进一步揭示黑碳-铅复合体粒子诱发的毒性作用机理提供依据。 方法：采用我们课题组前期研究制备的羧化黑碳-铅复合体粒子，并以商品黑碳和 制备的羧化黑碳进行比较，3 种黑碳材料均采用透射电镜(TEM)，电感耦合等离子体 原子发射光谱法 （ICP-AES ）, X 射线光电子能谱（XPS ）等化学分析方法进行理化性 质表征。分别以黑碳，羧化黑碳和羧化黑碳-铅复合体粒子的低剂量（2 mg/kg 体重） 对小鼠进行中长期暴露，染毒方式采用鼻腔滴注法。采用丙二醛，白蛋白，超氧化物 歧化酶等理化指标检测小鼠肺组织氧化损伤情况，并对小鼠肺泡灌洗液中的炎症细胞 及对小鼠附睾精子畸形率进行计数；通过ELISA 法检测小鼠BALF 和血清中的炎症因 子肿瘤坏死因子-α，白细胞介素-6，白细胞介素-8 及C-反应蛋白含量以及血清中睾酮 水平。进一步采用HE 染色法检查了 3 种黑碳粒子对靶器官（肺，肝，肾，睾丸） 的病理损伤特征。 结果：3 种黑碳材料的理化表征表明，商品黑碳氧化改性制备羧化黑碳后，成功 地制备了羧化黑碳-铅复合体粒子。研究表明，3 种黑碳粒子在不同的暴露时间点，ICR 小鼠的体重显著低于对照组，且小鼠的体重增长率也低于对照组（P0.05 ）。小鼠肺泡 灌洗液中氧化损伤指标检测也表明，与对照组相比羧化黑碳-铅复合体粒子能显著的诱 I 发肺泡的氧化损伤，且羧化黑碳-铅复合体粒子诱发的氧化损伤效应显著的高于羧化黑 碳粒子。小鼠肺泡灌洗液中炎症细胞检测也显示，3 种粒子暴露后肺泡灌洗液中炎症 细胞的数量显著升高，且以暴露 56 天的羧化黑碳-铅复合体处理组尤为显著。在小鼠 肺泡灌洗液中炎症因子的检测同样发现，3 种粒子暴露后小鼠炎症因子（IL-6，IL-8， TNF-α ）水平呈现时间-依赖效应，并且以羧化黑碳-铅复合体处理组最为显著（P0.05 ）。 外周血中的炎症因子水平变化趋势与肺泡灌洗液中炎症因子一致，均是羧化黑碳-铅复 合体明显的高于羧化黑碳 （P0.05 ）。同时，羧化黑碳-铅复合体诱发的肺泡灌洗液与 血清中IL-6 和CRP 含量水平呈现显著的相关性（P0.05 ），提示肺泡中的IL-6 和CRP 进入血液循环系统诱发明显的系统性炎症反应。此外，羧化黑碳-铅复合体粒子在短期 暴露后，睾酮水平显著下降（P0.05 ），而黑碳和羧化黑碳仅在长时间暴露后，睾酮水 平与对照差异达到显著水平（P0.05 ）。3 种粒子短期暴露后，精子密度显著下降，但 羧化黑碳-铅复合体暴露28d 以上时，精子的密度有上升的趋势。尤其是羧化黑碳和羧 化黑碳-铅复合体粒子在14d 和56d 暴露均显著的诱发精子畸形，但28d 暴露与对照无 明显差异。HE 病理检查结果进一步表明，3 种粒子长期暴露（56 d ）均能诱发肺部 损伤，尤其以羧化黑碳-铅复合体处理组最为明显。另外，羧化黑碳-铅复合体处理组 长期暴露也能诱发一定程度的肝脏，肾脏及睾丸的炎症反应和病理损伤。 结论：（1）小鼠体内低剂量长期暴露表明羧化黑碳-铅复合体粒子对小鼠体重的增 长产生不利影响，羧化黑碳-铅复合体粒子更能显著诱发肺部炎症反应和肺部氧化损 伤。此外，羧化黑碳-铅复合体粒子可通过血液循环诱发机体的系统毒性效应，导致肝 脏，肾脏和睾丸的炎症反应和病理损伤。（2 ）羧化黑碳-铅复合体粒子可诱发生殖系统 的毒性，在短期及长期暴露后引起睾酮水平显著下降，而黑碳和羧化黑碳仅在长时间 暴露后，睾酮水平与对照差异达到显著水平，同时羧化黑碳-铅复合体粒子暴露