毒死蜱的微生物降解研究应用进展.docVIP

毒死蜱目前仍是全球应用最广泛五种杀虫剂之一，也是中国用量最大农药品种，是对硫磷、甲胺磷等高毒有机磷农药替换品种，关键作为农用杀虫剂防治水稻、蔬菜等作物螟虫、韭蛆等近百种害虫，也作为卫生杀虫剂用于防治白蚁和蟑螂等[5]。美国在20世纪末期毒死蜱年用量就已达成约7000吨，其中3/4以上被应用于植物保护，其它则用于家庭卫生。毒死蜱系列产品（乐斯本乳油）于1984年在中国农业部农药检定所取得登记，获准在水稻、棉花、蔬菜等作物上使用；同年，上海市政府在菜篮子工程建设中，推荐了乐斯本等多个农药用于防治蔬菜害虫，以根本替换甲胺磷等高毒农药。 即使毒死蜱属于中等毒性杀虫剂，但危险性仍然很大，它能够经过皮肤进入人体，而且在人体内有累积现象，长久或反复给亚毒性剂量即可对细胞、神经轴突等产生影响，甚至可引发行为改变,WHO要求毒死蜱可接收摄取量为10μg/kg/d[6,7]。伴随健康及环境保护标准提升，在很多发达国家毒死蜱已被严禁使用，6月8日美国环境保护署（EPA）宣告，严禁在美国家庭和庭院内使用毒死蜱杀虫剂，指出这种常见杀虫剂会危害到儿童健康安全。依据美国环境保护署意见，新西兰政府决定含有毒死蜱产品自12月31日将不再应用于白蚁防控，并号召取消毒死蜱在全部有可能造成孩子暴露地方使用，10月28日，新西兰环境保护署提议严禁毒死蜱用于花园。为了确保儿童健康，几乎全部发达国家全部已经严禁毒死蜱应用于家居，不过并没有完全严禁其在农业领域使用；在大多数发展中国家，毒死蜱仍是应用最广泛农用杀虫剂、因为经济、技术发展限制，短期内也不可能完全严禁毒死蜱应用，那么怎样降低应用毒死蜱所造成负面影响就成为一个亟待处理课题。 1.2 毒死蜱微生物降解研究进展 微生物降解作用被认为是环境中有机磷农药残留降解最关键原因，所以分离筛选能够高效降解有机磷农药微生物是处理农药污染，进行环境修复一项有效方法[8,9]。一些有机磷降解菌降解作用含有广谱性，能降解多个不一样有机磷农药，这是因为有机磷农药含有相同化学结构，降解菌产生相关酶类作用于有机磷农药共有结构所致，而降解速度快慢则可能和农药本身化学稳定性、降解酶接触农药靶标位点难易程度、农药及降解产物对酶促反应反馈作用等多个原因相关[10,11]，有机磷农药初步水解路径图1-2。筛选能降解多个有机磷农药微生物菌株对于农药污染治理也是一项意义重大工作,现在也已经分离到了部分这么菌株[12]。比如，黄杆菌属细菌Flavobacterium sp. ATCC 27551水解酶能有效水解几乎全部已知O-P键[13]；缺点假单胞菌Pseudomonas diminuta也含有相同降解功效[14]；多年来也有部分含有类似降解功效菌株报道[15,16]。 通常来说，微生物长久连续接触某种农药就可能会诱导出降解该农药能力，所以常常从被农药污染土壤或施用过该农药土壤中分离针对该农药降解菌；也可经过人工方法使微生物适应目标农药，以获取高耐受能力和降解能力微生物菌株。较早相关毒死蜱降解菌报道是Sethunathan N.等[13]于1973年 从施用二嗪农土壤中筛选出黄杆菌（Flavobacterium sp.）和Serdar C.M.等[14]在1982年筛选出缺点假单胞菌（Pseudomonas diminuta），它们能以共代谢方法降解毒死蜱，不过不能以毒死蜱作为唯一碳源和能源生长。Mallick等[17]在1999年报道一株从土壤中筛选出节杆菌（Arthrobacter sp.）能在无机盐培养基中降解毒死蜱，能在48 h内将10mg/L毒死蜱完全降解。Ghanem等[18]和Li等[19]分别分离到了Klebsiella sp.和Sphingomonas sp.，这两个菌株能以毒死蜱作为唯一碳源和磷源。除细菌外，也分离到部分能降解毒死蜱真菌，Bending G.D.等[20]（）筛选出2株能降解毒死蜱真菌Hypholoma fascicularae和Coriolus versicolor。方华从土壤中筛选到一株毒死蜱降解菌，经判定为轮枝孢属（Verticillium sp.）真菌。 大量研究表明，在土壤或水体中微生物降解毒死蜱关键中间产物是3,5,6-三氯-2-吡啶酚(3,5,6-trichloro-2-pyridinol,TCP)，图1-3 [21,22]。Racke等人将毒死蜱用14C标识后进行微生物降解试验，其结果表明毒死蜱经土壤微生物作用后初步降解产物为3,5,6-三氯-2-吡啶酚(TCP)，TCP能被深入降解，终产物为CO2[23,24]。但TCP深入降解要缓慢得多，高浓度TCP对毒死蜱生物降解还有抑制作用，另外，TCP较毒死蜱水溶性更大，更轻易污染水体和土壤，从而放大毒死蜱危害[23]。毒死蜱初级降解产物除了TCP外还有O,O-二