第18氨基酸肽和蛋白质.ppt

烫发的 过程是 一个旧 二硫键 还原打 开而后 又氧化 形成新 的二硫 键过程 3 、肽结构测定 1 ） 氨基酸组分分析 2 ）氨基酸顺序分析 二硫键的拆分 选择性水解 ( 至少两种方法 ) 叠加法 纯多肽或蛋白质 氨基酸顺序分析 各条肽链 小肽段 各肽段的氨基酸顺 序 ( 至少两组 ) 肽链的氨基酸顺序 Amino Acids Analyzer 多肽链的选择性水解：酶法和化学法 化学法 —— 溴化氰水解法，选择性切割甲硫氨 酸的羧基所形成的肽键。 H 3 C S CH 2 CH 2 O R O HN CH C NH CH C H 3 C S CN + Br C N δ - δ + -Br - H 3 C S C N CH 2 CH 2 O R O HN CH C NH CH C H 2 C HN HC H 2 C O R C NH CH C O +H 2 O O HNHC O 高丝氨酸内酯 (homoserine lactone) R O + H 3 N CH C 肽中氨基酸顺序分析 —— 从 N- 端测序： Edman 降解法：可用于自动测序 H O O N C S + H N CH C NH CH C R 1 R 2 PITC Ph H N C O O NH CH C NH CH C R 1 R 2 第二步 HF 第一步 适用于 50 肽 N- 端氨基酸 S C N H Ph S HN O CH C NH CH C R 1 O R 2 S S Ph O HN N CH C NH CH C R 1 O H R 2 第三步 H + HN N Ph + Nh 2 CH R 1 O PTH- 氨基酸 O CH C R 2 PITC= 异硫氰酸苯脂 (phenyl isothiocyanate) PTH= 苯乙内酰硫脲 (phenylthiohydrantoin) C- 端氨基酸残基的分析：羧肽酶 羧肽酶是肽链外切酶（ exopeptidase ），即 它专门催化水解肽链末端（即 C- 端）的肽键。 羧肽酶断裂位点 O O O HN CH C NH CH C NH CH C O R 1 R 2 R 3 羧肽酶 A 水解断裂那些不是 Arg 和 Lys 的 C- 端氨基酸 羧肽酶 B 则仅水解断裂 C- 端为 Arg 或 Lys 的氨基酸 肽链的选择性断裂及鉴定 部分水解法常用的蛋白酶有： 胰蛋白酶 —— 只水解羰基属于赖氨酸、 精氨酸的肽键。 糜蛋白酶 —— 水解羰基属于苯丙氨酸、 酪氨酸、色氨酸的肽键。 溴化氰 ——— 只能断裂羰基属于蛋氨 酸的肽键。 4 、多肽的合成 要使各种氨基酸按一定的顺序连接起来形成 多肽是一向十分复杂的化学工程，最主要的是要 解决四大问题。 1 ．保护 -NH2 或 -COOH 2 ．活化反应基团（活化 -NH2 或 -COOH ） 3 ．生物活性 三、蛋 白 质 Proteins 一、分类 1. 根据形状分为： （ 1 ）纤维蛋白质 如丝蛋白、角蛋白等； （ 2 ）球状蛋白质 如蛋清蛋白、酪蛋白、血红蛋白、 γ - 球蛋 白（感冒抗体）等。 2 ．根据组成分： （ 1 ）单纯蛋白质 —— 其水解最终产物是 α - 氨基酸。 （ 2 ）结合蛋白质 ——α - 氨基酸 + 非蛋白质（辅基） 根据蛋白质的功能分； （ 1 ） 活性蛋白 按生理作用不同又可分为；酶、激素、抗体、 收缩蛋白、运输蛋白等。 （ 2 ）非活性蛋白 担任生物的保护或支持作用的蛋白，但本 身不具有生物活性的物质。 二、蛋白质的结构 1 ．蛋白质的一级结构 —— 50 个以上氨基酸结合而形成的多肽链 2 ．蛋白质的二级结构 —— 肽链中的氨基酸以氢键形成的多肽在 空间排列（构象） 3 ．蛋白质的三级结构 由蛋白质的二级结构在空间盘绕、折叠、卷曲而形成的更为复 杂的空间构象称为蛋白质的三级结构。 4 ．蛋白质的四级结构 由一条或几条多肽链构成蛋白质的最小单位称为蛋白质亚基， 由几个亚基借助各种副键的作用而构成的一定空间结构称为蛋 白质的四级结构。 α －螺旋： β－折叠片： 肽链伸展在褶纸形的平面上，相邻的肽链又通过氢键缔合。 很多蛋白质常常是在分子链中既有 α - 螺旋，又有 β - 折叠，并 且多次重复这两种空间结构： 第十八章 氨基酸、肽和蛋白质 Amino Acids, Peptides and Protein 本章主要内容 一、 氨基酸 (Amino Acid) （重点内容） （一） 结构特点 （二） 20 种基本氨基酸 （三） 氨基酸的特性 （四） 氨基酸的合成 与 拆分 二、 肽 (Peptides) 三、蛋白质 (Proteins) （ 简述 ） 一、 氨基酸 Amino Acid ? 分子中既含氨基，又含羧基的