探讨肠道微生态(厌氧菌为主)研究技术的应用情况.pdfVIP

探讨肠道微生态（厌氧菌为主）研究技术的应用情况 来有一段时间了，发现在《微生物学技术讨论版》中 有关肠道厌氧菌研究方法的内容几乎没有。本人正在进行 肠道厌氧菌的研究，有许多问题不甚清楚，也有一些感 想，希望与各位战友分享，互相帮助，共同提高。特开此 主题，望各位踊跃发表自己的见解。 也可与我联系：loujingan@ 在人体的肠道内栖息着大约 1014 个约 400~500 种细菌，是 人体细胞总数的 10-20 倍。肠道内的细菌对人体肠道的生 长发育、免疫功能、消化吸收等功能起着重要的作用。为 了更好的研究肠道正常菌群的功能以及与机体的相互关 系，对肠道内细菌的分离、鉴定和定量非常重要。到目前 为止，人们对肠道正常菌群的了解是通过对粪便标本选择 性培养计数菌落数而获得的。随着分子生物学的发展以及 分子生物学技术在微生态领域的应用，人们对微生态学的 研究取得了突破性的进展。国外已经开展这方面的研究， 国内在这方面起步较晚，且研究缺乏整体性和连续性。往 往只研究其中的某一方面，一旦完成了，就没有继续下 去。 目前对健康人的大便标本的研究中已知肠道内栖息着大约 1014 个细菌，是人体细胞总数的 10~20 倍，约 400~500 种。其中 90%~99.9％是厌氧菌，肠杆菌、肠球菌等需氧菌 仅占菌群极少的一部分。在这些细菌中主要包括类杆菌 属、真杆菌属、双歧杆菌属、乳酸杆菌属等至少 14 个菌 属。大量的研究结果表明，肠道内的细菌对人体的生长发 育、免疫功能、营养、发病机制、健康等起着重要的作 用。肠道内细菌的分离、鉴定和定量对于研究肠道内菌群 的功能以及与机体的相互关系非常重要，同时它能提供结 肠细菌代谢潜能的一个重要指标。 虽然对这个方面不太了解，可还是要积极参与一下：微生 态制剂在国外研究得比较早，在国内的话也有以前的三株 口服液，以及常见的双歧杆菌和乳酸杆菌等相关产品；目 前研究发现微生态与人类健康和寿命也有密切的关系，它 的机理是微生态菌能分解和减少肠道中的有害物质，如 胺、吲哚、硫化氢、亚硝酸盐等，这些物质是诱发大肠 癌，引发人体衰老、患病的重要致病内因。 在肠道微生态（厌氧菌为主）研究应用比较多的技术包括 16Sr RNA/rDNA 序列分析技术，我查到一篇文章与大家一 起分享，也希望我们的讨论能够起到泼砖引玉的作用，欢 迎大家继续探讨！ 16Sr RNArDNA 序列分析技术在瘤胃细 菌微生态系统研究中的应用.caj (103.85k) 我也插两句 微生物多样性中相当部分当属于厌氧菌的多样性，由于培 养相对困难，厌氧菌的研究要远落后于好氧菌，分子生物 学的手段也基本限于厌氧菌的检测，分类鉴定等，而真正 利用基因工程技术改造厌氧菌的研究很少。近来有利用改 造厌氧菌来提高纤维素降解的，在医学上也有采用厌氧菌 为载体进行肿瘤治疗的报道。事实上，在自然界中大量难 降解物质都可以由厌氧菌降解，特别是在一些极端环境中 （比如油井中的石油微生物）。 我比较看好以微生物多样性为理论基础的，以构建环境微 生物 DNA 文库为平台，筛选获得新酶，新活性物质的研 究。 1、 微生物重量分布　　人体表面及与外界相通的腔道常 栖居着种类繁多、数量庞大的微生物。一个健康人由 1013 个动物细胞组成，而定植的原核细胞达 1014 个，人体自身 细胞只占栖居在体表和体内微生物细胞的 10%。按重量计 算：人体携带的微生物总重量约为 1271g，其中肠道占 1000g，肺：20g，口腔占 20g，鼻占 10g，眼 1g，阴道 29g，皮肤 200g。人体携带的微生物细胞主要在肠道，胃 肠的微生物量占人体总微生物量的 78.67%，粪便重要的 1/3 ～2/5 是微生物。人体微生物总量相当于一个肝脏大 小，产生的酶多于肝脏产生的酶量。 2、 厌氧菌主要菌属在体分布的情况如下： 肠道菌群中各 类细菌构成：在正常微生物群中，对许多高等动物和人类 来说，厌氧菌占优势，其中在人的肠道内专性厌氧菌占总 数的 99%左右。专性厌氧菌：1011-12CFu/g 肠内容兼性厌 氧菌：≤108CFu/g 肠内容真菌：≤103CFu/g 肠内容部 位 主要微生物皮肤 表皮葡萄球菌、棒状杆菌、大肠埃希氏杆 菌、痤疮丙酸杆菌等。 口腔及上呼吸道 葡萄球菌、卡他 莫拉氏菌和链球菌、大肠埃希氏菌、嗜血杆菌、棒状杆 菌、假丝酵母菌、梭形杆菌、类杆菌、消化链球菌、乳杆 菌等。其中厌氧菌比需氧菌多肠道(空肠末段、回肠、结肠) 肠杆菌科细菌、假单胞菌、肠